[发明专利]一种高亲和力抗重金属镉单克隆抗体及其应用

权利要求书

1.一株分泌高亲和力抗重金属镉单克隆抗体的杂交瘤细胞株1H9，其特征在于，该杂交瘤细胞株1H9于2015年3月4日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC C201521。

2. 一种高亲和力抗重金属镉单克隆抗体1H9，其特征在于，由权利要求1所述杂交瘤细胞株1H9分泌所得；所述单克隆抗体1H9的可变区包括重链可变区和轻链可变区；所述重链可变区基因序列如SEQ ID NO.1所示，所述轻链可变区基因序列如SEQ ID NO.2所示；所述重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示，所述轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。

3.权利要求2所述高亲和力抗重金属镉单克隆抗体1H9在制备金属镉的免疫学检测试剂盒方面的应用。

4.一种非诊断的金属镉的直接竞争Elisa检测方法，其特征在于，步骤如下：

（1）包被：将权利要求2的镉单克隆抗体1H9稀释至工作浓度加入包被板，37℃条件下孵育后，再用脱脂奶粉和聚乙二醇20000为混合封闭液，37℃恒温封闭；

（2）加样：每孔分别加入待测样品和酶标物Cd-EDTA-HRP，37℃孵育后，进行TMB底物显色，浓硫酸终止实验，进行酶标仪读数测定结果。

5.根据权利要求4所述金属镉的直接竞争Elisa检测方法，其特征在于，步骤（1）包被：将镉单克隆抗体1H9稀释至工作浓度，每孔100μL，37℃条件下孵育3小时后，用PBST缓冲液洗涤3次，再用5%的脱脂奶粉和2%的聚乙二醇20000为混合封闭液，37℃恒温封闭1小时，PBST缓冲液洗涤3次。

6.根据权利要求4所述金属镉的直接竞争Elisa检测方法，其特征在于，步骤（2）加样：每孔分别加入50μL的待测样品和50μL工作浓度酶标物Cd-EDTA-HRP，37℃孵育10min，PBST缓冲液洗涤3次，进行TMB底物显色，37℃避光15min，2M的浓硫酸终止实验，进行酶标仪读数测定结果。