[发明专利]一种植物干馏液、其制备方法及其在提高丹参毛状根有效成分含量中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种从植物中提取出来的干馏液及其制备方法和应用，具体涉及一种从山楂核、酸枣核和核桃壳中提起得到的干馏液及其制备方法和在提高丹参毛状根有效成分含量中的应用，属于环境与植物有效成分提取技术领域。

背景技术

随着“回归自然”潮流的涌起，从天然植物中提取、分离具有药用价值的活性成分已成为开发新药的一个重要途径。随着市场需求的不断增加，长期不当采集导致生态环境破坏严重，野生药用植物资源日益锐减。而人工引种栽培困难而且易受环境制约，生长缓慢，其体内的药用成分含量不稳定。这些都成为药用植物扩大规模进军国际市场的一大瓶颈。通过药用植物细胞与组织培养手段来规模化生产植物次生代谢物是一种比较有效的手段，其中需要解决的一个关键问题就是筛选并添加诱导子来提高药用植物细胞或组织中有效次生代谢产物的产量，降低生产成本，实现工业化生产。丹参主要用于治疗心、脑、血管疾病、肥胖及高血脂症，主要药效成分为脂溶性成分（二氢丹参酮、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA）和水溶性成分（丹酚酸B、迷迭香酸）。为了提高丹参有效成分的产量，目前较为常用的方法是用发根农杆菌菌株Agrobacterium rhizogenes诱导丹参叶片获得丹参毛状根，通过继代丹参毛状根获得丹参有效成分。为提高有效成分的含量，多在培养基中添加诱导子，如酵母银离子、茉莉酸甲酯、水杨酸等，这些诱导子多为人工合成，存在成本高、效率低及污染严重等问题，严重制约了药用植物药效成分大规模生产的进程。

干馏液是指将植物材料放到干馏釜内加热炭化过程中冒出的烟气自然冷却液化得到的浓缩液体。近年来，干馏液的医用和食用价值受到重视，广泛用于杀菌、疾病预防、食品防腐、调味、水果保鲜等领域。然而，将干馏液用于中药材培育上鲜有报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种植物干馏液，该植物干馏液能作为丹参毛状根培养中的诱导子，显著提高丹参毛状根培养中有效成分的积累，对加速生产丹参组织培养中有效成分具有重要意义。

本发明的另一目的是提供上述植物干馏液的制备方法，该方法简单、有效，能快速获得所需干馏液。

本发明的另一目的是提供上述植物干馏液在促进丹参毛状根培养中有效成分的含量（积累）的应用。

目前，干馏液主要作为杀菌、抑菌成分用于药物中，在促进中药材有效成分积累中未见报道，发明人在研究中发现，将干馏液加入丹参毛状根培养中作为诱导子能显著提高丹参毛状根中有效成分的含量。并且从实验结果看，不同植物来源的干馏液对提高丹参药效成分积累的影响是不同的，同一干馏液对丹参在植株水平和细胞、组织培养水平中药效物质积累的影响也是不同的，同一干馏液对不同药材的有效成分的积累也是不同的。发明人通过深入研究，将多种干馏液用于丹参毛状根组织培养中，经过大量的筛选实验，最终得到了适合丹参毛状根培养中药效成分积累的干馏液，并具体研究了该干馏液的制备方法和使用方法，从而为将干馏液用于提高丹参毛状根培养中药效成分积累提供了重要的技术支持。

本发明具体技术方案如下：

一种植物干馏液的制备方法，包括将山楂核、酸枣核和核桃壳进行干馏得干馏液的步骤。

上述方法中，进一步包括将山楂核、酸枣核和核桃壳分别在140～145℃、240～245℃、300～360℃下进行干馏，将这三段温度下所得的干馏液合并的步骤。

上述方法中，山楂核、酸枣核和核桃壳的质量比为1～13:1～2:1～3，优选为11:2:2或13:1:1。

上述方法中，在140～145℃保温1-2h，在240～245℃保温2-3小时，在300～360℃保温1-2小时。

上述方法中，进一步的，将合并后的干馏液除杂，得植物干馏液。优选的，合并后的干馏液采用下述方法除杂：将合并后的干馏液搅拌均匀、静置分层，取上清液；将上清液蒸馏，所得蒸馏液用活性炭处理后过滤，所得滤液即为植物干馏液。

上述方法中，上清液在100～105℃常压蒸馏。

上述方法中，上清液蒸馏时间为2h。

上述方法中，蒸馏液加入其质量10%的活性炭。

上述方法中，活性炭在95℃下处理45分钟，进行除杂。

按照上述方植物干馏液的制备方法制得的植物干馏液也在本发明的保护范围之内。

本发明植物干馏液可以用于丹参组织培养中，用于促进丹参毛状根有效成分的含量，步骤包括：将上述植物干馏液作为诱导子，用于丹参毛状根的组织培养中，促进丹参毛状根有效成分的积累。