[发明专利]快速诱导繁殖盐生草幼根愈伤组织的方法有效
申请号: | 201510112968.8 | 申请日: | 2015-03-16 |
公开(公告)号: | CN104823845B | 公开(公告)日: | 2017-03-29 |
发明(设计)人: | 王化俊;姚立蓉;汪军成;任盼荣;李吉睿;孟亚雄;李葆春;马小乐;杨轲;赖勇;司二静;马艳红;李爱博 | 申请(专利权)人: | 甘肃农业大学 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 兰州振华专利代理有限责任公司62102 | 代理人: | 张真 |
地址: | 730070 *** | 国省代码: | 甘肃;62 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 快速 诱导 繁殖 盐生草 幼根 组织 方法 | ||
1.一种快速诱导繁殖盐生草幼根愈伤组织的方法,其特征在于步骤如下:
(1)无菌外植体的获得:将盐生草种子置于超净工作台,首先用无菌水清洗种子,然后用75%的酒精处理0.5-1min,紧接着用无菌水将种子表面的酒精清洗干净,再用20%的次氯酸钠处理1.5-2min,最后用无菌水将种子表面的次氯酸钠清洗干净,获得盐生草无菌种子,将灭菌后的种子放置于培养无菌实生苗的培养基中培养10-15d,获得无菌实生苗的根系作为诱导愈伤的外植体;
(2)愈伤组织诱导:将步骤(1)获得的无菌实生苗幼根组织横切为约0.3-0.5cm长的小段作为诱导愈伤的材料,接种于诱导愈伤组织培养基上培养10-15d,诱导愈伤发生;
(3)愈伤组织增殖培养:将步骤(2)获得的颜色浅白,质地疏松的愈伤组织切割成直径约0.1-0.3cm的小块,然后转接到诱导愈伤组织增殖培养基中,培养10-15d后继续转接到新的诱导愈伤组织增殖培养基中进行继代增殖,最终获得颜色嫩白,结构致密的优良愈伤组织材料。
2.如权利要求1所述的一种快速诱导繁殖盐生草幼根愈伤组织的方法,其特征在于:步骤(1)中所述的培养无菌实生苗的培养基由1/2Hoagland-Hoagland完全营养液,6-8g/L的琼脂粉组成,PH=5.7-5.8。
3.如权利要求1所述的一种快速诱导繁殖盐生草幼根愈伤组织的方法,其特征在于:步骤(2)中所述的诱导愈伤组织培养基由1/2MS-MS营养液,1.0-2.0mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸,5-7g/L琼脂,20-30g/L蔗糖,0.05-0.1g肌醇组成,PH=5.7-5.8。
4.如权利要求1所述的一种快速诱导繁殖盐生草幼根愈伤组织的方法,其特征在于:步骤(3)中所述的诱导愈伤组织增殖培养基由1/2MS-MS营养液,1.0-2.0mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸,5-7g/L琼脂,20-30g/L蔗糖,0.05-0.1g肌醇组成,PH=5.7-5.8。
5.如权利要求1所述的一种快速诱导繁殖盐生草幼根愈伤组织的方法,其特征在于:所述的步骤(1)、(2)、(3)实生苗培养、幼根愈伤诱导和愈伤增殖均在连续光照培养,光照强度在1500-2000lx之间,湿度60-70%的环境下进行。
6.如权利要求1所述的一种快速诱导繁殖盐生草幼根愈伤组织的方法,其特征在于:所述产生的愈伤组织质嫩,并且可通过称量法测定愈伤组织的生长量。
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