[发明专利]具有乙酰胆碱酯酶抑制活性的三萜化合物及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于药物技术领域，涉及羽扇豆烷型三萜类化合物，并以其为活性成分的药物组合物及其制备方法，特别是涉及具有乙酰胆碱酯酶抑制活性的三萜化合物及其制备方法。

背景技术

阿尔茨海默症（Alzheimer’s disease，AD）是以记忆损伤、认知功能障碍、行为障碍和生活自理能力下降为特征的慢性神经退行性疾病，是老年痴呆中最常见的疾病。老年性痴呆症危害着病人的健康，给我们的家庭和社会带来沉重的负担。随着我国逐步进入老龄化，因此，AD日益成为当前老年医学面临的最为严峻的问题之一。医学治疗上多采用乙酰胆碱酯酶抑制剂（acetylcholinesterase inhibitor, AChEI）抑制 AChE活性，延缓ACh水解的速度，提高突触间隙 ACh 的水平，从而发挥对 AD 的治疗作用。目前临床上还没有药物可以完全保护神经元，抑制神经元内部 ACh的降解是治疗老年痴呆症的主要手段，AChEI 是美国 FDA 许可唯一作为治疗 AD 的药物，也是治疗 AD 最有效的药物之一。近来从中草药、微生物的代谢产物和化学合成中筛选 AChEI的研究倍受关注。

中药金樱子Rosa laevigata Michx.为蔷薇科蔷薇属植物在我国分布非常广泛。始载于《蜀本草》，其果实，根和叶均可入药。《本草纲目》中记载金樱子：性酸、涩、平、无毒；主治脾泻下痢、止小便利、涩精气。金樱子果实中含有丰富的三萜皂苷、黄酮及多糖类化合物，其化学成分和药理活性的多样性近年来成为国内外学者研究的热点。经查，现有技术中未见有本发明的化合物及其具有抗老年痴呆或神经退行性疾病价值治疗前景的活性的相关报道。

发明内容

本发明的目的在于提供具有乙酰胆碱酯酶抑制活性的三萜化合物及其制备方法，本发明通过对金樱子果皮化学成分进行研究，从中分离得到两个羽扇豆烷型三萜类新化合物，化合物具有显著的抑制乙酰胆碱酯酶的作用，是具有抗老年痴呆或神经退行性疾病价值的化合物。

本发明的上述目的是由下述的技术方案得以实现的：

    具有乙酰胆碱酯酶抑制活性的三萜化合物，所述化合物包括以下两种，其结构式为：

    具有乙酰胆碱酯酶抑制活性的三萜化合物制备方法，所述方法包括以下制备步骤：

（1）金樱子果皮6-10倍量乙醇：水（3：1）微波辅助提取2-3次，合并滤液，减压浓缩得浸膏；将浸膏分散在水中，分别用等体积正己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇反复多次萃取，减压浓缩得到正己烷层、二氯甲烷层、乙酸乙酯层、正丁醇层；

（2）分别对总提物、正己烷层、二氯甲烷层、乙酸乙酯层、正丁醇层进行乙酰胆碱酯酶抑制活性测试，仅二氯甲烷活性明显高于总提物活性，因此确定其为活性部位；

（3）将二氯甲烷萃取物进行聚酰胺柱分离，经过正己烷：二氯甲烷: 甲醇进行混合梯度洗脱，减压浓缩得组分A-E。5个流分同样经过乙酰胆碱酯酶抑制活性测试，确定D为活性部位；

（4）将组分D进行C8反相色谱分离，以甲醇：水混合溶剂为流动相进行梯度洗脱，得10流分，其中第5 和第9 流分经高效液相色谱分离得化合物1 和2。

    具有乙酰胆碱酯酶抑制活性的三萜化合物，所述化合物用在制备抗老年痴呆或神经退行性疾病药物中。

本发明的有益效果为：

本发明首次公开了中药金樱子果皮中两个羽扇豆烷型三萜衍生物的结构。本发明通过对金樱子果皮化学成分进行研究，从中分离得到两个羽扇豆烷型三萜类新化合物，经过改进的Ellman法进行乙酰胆碱酯酶抑制活性的测定，结果表明两个新化合物具有显著的抑制乙酰胆碱酯酶的作用，且其呈现明显的量效与时效关系，显示该类化合物在制备抗老年痴呆和神经退行性疾病药物中的应用前景。

附图说明

图1是化合物1的¹H NMR图谱；

图2是化合物1的¹³C NMR图谱；

图3是化合物1的HSQC图谱；

图4是化合物1的HMBC图谱；

图5是化合物2的¹H NMR图谱；

图6是化合物2的¹³C NMR图谱；

图7是化合物2的HSQC图谱；

图8是化合物2的HMBC图谱；