[发明专利]一种灭活疫苗灭活程度的检测方法有效
| 申请号： | 201510115801.7 | 申请日： | 2015-03-17 |
| 公开（公告）号： | CN104698166A | 公开（公告）日： | 2015-06-10 |
| 发明（设计）人： | 张琳;张秀美;丁雅苓;丁志勇;黄庆华;徐敏丽 | 申请（专利权）人： | 山东省农业科学院畜牧兽医研究所 |
| 主分类号： | G01N33/569 | 分类号： | G01N33/569;G01N33/68 |
| 代理公司： | 济南泉城专利商标事务所 37218 | 代理人： | 李桂存 |
| 地址： | 250100 *** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 疫苗 程度 检测 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种灭活疫苗灭活程度的检测方法，其特征在于：以灭活中间产品所含空间表位的灭活作为疫苗灭活完全的标志。
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：中间产品经甲醛灭活后，以灭活中间产品所含的空间表位为目的蛋白，将此目的蛋白作为夹心ELISA法的检测对象，检测结果为阳性表明灭活不完全，阴性则表明灭活完全。
3.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于：所述空间表位的确定方法有肽扫描、氨基酸突变、X-ray、质谱、噬菌体展示。
4.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述夹心ELISA法包括以下步骤：
（1）将特异性抗体包被固相载体ELISA板，孵育后洗涤除去未结合的抗体和杂质，加入待检样品抗原，孵育一定时间，使抗原与固相载体上的抗体充分反应，形成固相抗原抗体复合物；
（2）洗涤除去其他未结合物质，随后加入酶标的特异性抗体，孵育使形成固相抗体-待测抗原-酶标抗体夹心复合物，洗涤除去未结合酶标抗体；
（3）最后加入显色底物进行显色，通过分光光度计测定OD450的值，结合阴阳性对照，最终确定待检样品的灭活程度。
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