[发明专利]一种基于功能化氧化石墨烯温敏水凝胶的制备方法及其应用

权利要求书

1.一种基于功能化氧化石墨烯温敏水凝胶的制备方法，其特征在于，该水凝胶作为药物载体系统，是由负载药物的功能化氧化石墨烯和泊洛沙姆P₄₀₇/P₁₈₈凝胶混合制成，负载抗肿瘤药物的功能化氧化石墨烯和泊洛沙姆P₄₀₇/P₁₈₈凝胶的体积比为1-3:1，具体由以下步骤实现：

1）称取氧化石墨烯80-120 mg和壳聚糖400-600 mg溶于40-60 ml的2-(N-吗啡啉)乙磺酸缓冲液中，超声1 h得到均匀分散的悬浮液，称取1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐480-720 mg和N-羟基琥珀酰亚胺640-960 mg，依次加入上述混合液中，继续超声6 h；接着，将反应液室温下磁力搅拌16 h，反应停止后，将混合液通过0.2 μm的水膜过滤，用超纯水抽洗至中性以除去未反应的壳聚糖，将所得滤饼用16-24 ml 超纯水重悬后， -20℃预冻，冷冻干燥48 h，即得功能化氧化石墨烯；

所述的2-(N-吗啡啉)乙磺酸缓冲液是由2-(N-吗啡啉)乙磺酸加水，调制成pH值为5的溶液；

2）称取功能化氧化石墨烯4-6 mg溶于超纯水4-6 ml中，在功率400w下探超40次，每间隔5 s探超一次，每次5 s，成为功能化氧化石墨烯分散液；然后称取抗肿瘤药物多西他赛4-6 mg，溶于200-300 μl的二甲基亚砜中，制成多西他赛溶液；将功能化氧化石墨烯分散液边超声边缓慢滴加到多西他赛溶液中；滴加完毕，在功率400 w下探超20次，每间隔5s探超一次，每次5 s，然后，10000 r/min离心10 min，弃去上清，去除二甲基亚砜，得沉淀物；取沉淀物加入浓度为10 mg/ml的泊洛沙姆188溶液4-6 ml溶解，在功率400 w下探超20次，每间隔5 s探超一次，每次5 s，4000 r/min离心10 min，取上清液，弃去沉淀，去除游离的多西他赛，-20℃预冻，冷冻干燥48h，制得负载多西他赛的功能化氧化石墨烯；

3）采用冷溶法制备原位凝胶溶液：称取泊洛沙姆407 0.16-0.24 g加入到4 ℃预冷的超纯水4-6 ml中溶解，再加入泊洛沙姆188 0.88-1.32 g，于4℃冰箱中过夜至充分溶胀，得P₄₀₇/P₁₈₈温敏水凝胶溶液；

4）室温下，将负载多西他赛的功能化氧化石墨烯按体积比1-3:1缓慢滴加入P₄₀₇/P₁₈₈温敏水凝胶溶液，搅拌均匀，成负载多西他赛的功能化氧化石墨烯温敏水凝胶，即基于功能化氧化石墨烯温敏水凝胶。