[发明专利]一种发酵蛹虫草纳米微粒制备抗氧化肽的方法

说明书

一种发酵蛹虫草纳米微粒制备抗氧化肽的方法，其特点是，将蛹虫草经温度60～80℃烘干，粗粉碎过40目筛，再纳米粉碎3～5h，制得蛹虫草纳米微粒；将蛹虫草纳米微粒加入到蒸馏水中，摇匀，自然PH值，在高压灭菌锅中121℃灭菌20～30min，制得种子培养基；在蒸馏水中放入牛肉膏,蛋白胨，氯化钠,PH在6～7，121℃高压蒸汽灭菌20～30min，冷却制得普通牛肉膏蛋白胨培养基，将地衣芽孢杆菌菌株斜面菌种接种普通牛肉膏蛋白胨培养基，于30～40℃，培养1～2d制得接种活化好的地衣芽孢杆菌，将活化好的地衣芽孢杆菌接种子培养基中，制得抗氧化肽成品。其制备方法高效、低成本、生产周期短、适用于规模化生产。

技术领域

本发明属于微生物发酵技术领域，涉及一种发酵蛹虫草纳米微粒制备抗氧化肽的方法。

背景技术

现代研究发现，几乎所有疾病的产生都和自由基有关。自由基具有高度的活泼性和极强的氧化反应能力。目前，天然抗氧化剂的开发和利用已经普遍展开，就我国而言，存在种类单一，生产力较低，产品稳定性较差的弊端。生物活性肽以其用量少、活性强的独特优势，越来越引起人们重视，其工业化生产也成为当前食品和医药行业发展的大趋势。现已报道国内外从食物蛋白源中酶解或提取具有抗氧化活性的肽有大豆肽、玉米肽、青雪肽等。

蛹虫草(Cordyceps militaris L.Link)又名北冬虫夏草，是我国传统药食两用真菌。蛹虫草含有虫草素、腺苷、虫草多糖、SOD等多种活性成分，具有降血糖、降血脂、抗菌、抗癌、提高免疫力等多种功效。目前，对蛹虫草的研究主要集中在活性成分的提取、分离纯化及药理、药效上。市场上已有多种蛹虫草制品，如虫草茶、虫草酒、虫草饮料和各类胶囊、片剂；生物活性肽日本以为功能因子已经开发出婴儿食品、运动食品、降压食品等系列食品；生物活性肽国内以三九集团有限公司为代表，也开发出多种保健品，如“三九蛋白肽”、“三九大豆多肽”、“三九降糖肽”等。蛹虫草富含蛋白质30％以上，却很少作为功能因子开发利用。有关蛹虫草多肽的研究，见钱卫文等采用蛋白酶水解经脱脂、制粉后的蛹虫草粉，制的多肽含量40％～60％。

获得生物活性肽主要有三种方式：1、从组织器官中提取的天然活性肽，提取过程繁琐；2、人工合成的多肽，存在多种化合物残留问题；3、体外水解蛋白质生产活性肽。目前，利用动植物蛋白制备抗氧化肽主要采用酸水解或酶解法，此两种方法存在水解时间长、水解效率低下，产物与蛋白不易分离等缺陷，因而成为限制抗氧化肽市场化应用的障碍。

发酵法制备蛹虫草抗氧化肽，是利用蛹虫草纳米微粒直接发酵，省去蛹虫草蛋白质提取繁琐工艺，同时，通过微生物自身的复合酶系可以酶解释放出高浓度、分子量分布较为集中的活性肽，提高水解率，增加酶解产物抗氧化活性。目前，将纳米技术结合微生物发酵对蛹虫草进行深加工的研究未见文献报道。

发明内容

本发明的目的在于，克服现有技术弊端，提供一种高效、低成本、生产周期短、适用于规模化生产的发酵蛹虫草纳米微粒制备抗氧化肽的方法。

本发明的目的通过以下技术方案实现：一种发酵蛹虫草纳米微粒制备抗氧化肽的方法，其特征是，它包括以下步骤：

(1)将蛹虫草经温度60～80℃烘干，粗粉碎过40目筛，再纳米粉碎3～5h，制得蛹虫草纳米微粒；

(2)按蛹虫草纳米微粒与蒸馏水1：20比例，将蛹虫草纳米微粒5g加入到蒸馏水100mL中，摇匀，自然PH值，在高压灭菌锅中121℃灭菌20～30min，制得种子培养基；