[发明专利]一种脱卤酶DhmB及其编码基因与应用

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种脱卤酶DhmB及其编码基因与应用。

背景技术

自然界存在大量的卤代烃、卤代芳香酸、卤代链烷酸和卤代醇等含卤化合物。这些卤代有机物可以用作有机溶剂、杀虫剂、医药农药中间体等。卤代有机物普遍具有环境毒性，而且一般比较稳定，不易被快速降解，而且容易通过食物链在人与动物脂肪组织中积累，对人与动物的健康造成极大的威胁。

脱卤酶(Dehalogenase,EC 3.8.1)的作用机理：能够催化有机卤素化合物中碳-卤键裂解，使卤素原子从化合物中释放出来。脱卤酶能够通过去除有机氯农药中的氯，从而消除其毒性，这对治理我国曾大量使用过的有机氯农药(二氯苯氧基乙酸、三氯苯酚、六六六等)的残留问题具有重要应用价值。脱卤酶可应用于粮食、蔬菜、水果，茶叶以及中成药中含氯农药残留的清除和检测；脱卤酶还可应用于含氯毒剂(芥子气)的脱毒处理，这对于一些遗留化武无害处理，保护环境安全具有重要意义。

当前已发现的脱卤酶由于在催化活性、酶稳定性、产率等方面具有很大缺陷，因此开发新一代高活力，高稳定性以及高效表达的脱卤酶具有重要应用价值和社会意义。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种蛋白质。

本发明提供的蛋白质是如下a)或b)的蛋白质：

a)氨基酸序列是序列表中序列2的蛋白质；

b)将序列表中序列2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的且与降解卤素化合物相关的蛋白质。

上述一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加为不超过10个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加。

本发明的另一个目的是提供与上述蛋白质相关的生物材料。

本发明提供的与上述蛋白质相关的生物材料为下述B1)-B5)中的任一种：

B1)编码上述蛋白质的核酸分子；

B2)含有B1)所述核酸分子的表达盒；

B3)含有B1)所述核酸分子的重组载体或含有B2)所述表达盒的重组载体；

B4)含有B1)所述核酸分子的重组菌或含有B2)所述表达盒的重组菌或含有B3)所述重组载体的重组菌；

B5)含有B1)所述核酸分子的细胞系或含有B2)所述表达盒的细胞系或含有B3)所述重组载体的细胞系。

上述生物材料中，所述细胞系不包括植物和动物的繁殖材料。

上述生物材料中，B1)所述核酸分子为如下1)或2)或3)的DNA分子：

1)其核苷酸序列是序列表中序列1所示的DNA分子；

2)与1)限定的DNA序列至少具有70％、至少具有75％、至少具有80％、至少具有85％、至少具有90％、至少具有95％、至少具有96％、至少具有97％、至少具有98％或至少具有99％同源性且编码所述蛋白质的DNA分子；

3)在严格条件下与1)或2)限定的DNA序列杂交且编码所述蛋白质的DNA分子；

所述严格条件可为如下：在50℃，7％十二烷基硫酸钠(SDS)、0.5M Na₃PO₄和1mM EDTA的混合溶液中杂交，在50℃，2×SSC，0.1％SDS中漂洗；还可为在50℃，在7％SDS、0.5M Na₃PO₄和1mM EDTA的混合溶液中杂交，在50℃，1×SSC，0.1％SDS中漂洗；还可为在50℃，7％SDS、0.5M Na₃PO₄和1mM EDTA的混合溶液中杂交，在50℃，0.5×SSC，0.1％SDS中漂洗；还可为在50℃，7％SDS、0.5M Na₃PO₄和1mM EDTA的混合溶液中杂交，在50℃，0.1×SSC，0.1％SDS中漂洗；还可为在50℃，7％SDS、0.5M Na₃PO₄和1mM EDTA的混合溶液中杂交，在65℃，0.1×SSC，0.1％SDS中漂洗；也可为在65℃，6×SSC，0.5％SDS的溶液中中杂交，在2×SSC，0.1％SDS和1×SSC，0.1％SDS各洗膜一次。

上述生物材料中，含有B3)所述重组载体的重组菌是将含有B1)所述核酸分子的重组载体导入宿主菌中得到的；

所述含有B1)所述核酸分子的重组载体是将编码上述蛋白质的核酸分子插入表达载体，得到表达上述蛋白质的载体。