[发明专利]一种红根野蚕豆组织培养方法

权利要求书

1.一种红根野蚕豆组织培养方法，其特征在于：包括如下步骤：

(1)外植体的处理和保存：将从野外采摘回来的红根野蚕豆种子作为外植体，外植体用84消毒液的100倍稀释液浸泡8～15分钟，再用自来水冲洗0.5～1小时，置于干净的玻璃器皿内备用，未用完的放于冰箱内保存以便日后使用；

(2)外植体的灭菌：将处理过的外植体置于超净工作台上，用75％的酒精消毒25～35秒，再在体积浓度为0.1％的升汞中浸泡8～10分钟后，用无菌水冲洗2～4次；

(3)外植体接种：将上述灭菌过的外植体破壳接种于培养瓶中，培养基采用诱导培养基一号，并进行封口标记；

(4)组织培养：将接种好的培养瓶置于25～35℃的黑暗温室中培养5～8天，再置于25～35℃的光照温室中培养25～40天，得到红根野蚕豆种苗；

(5)继代培养：将培养好的平均株高5～6cm的红根野蚕豆种苗在超净工作台上用接种工具以节为单位进行切割，将切割好的茎段接种于诱导芽和根的培养基二号中，并进行封口；将接种好的苗置于20～30℃的黑暗温室中培养5～8天后，再置于25～30℃的光照温室中培养30～50天，得到红根野蚕豆的完整植株；

(6)炼苗和移栽：将培养好的红根野蚕豆完整植株置于温室大棚内进行5～8天的炼苗后，进行移栽。

2.根据权利要求1所述一种红根野蚕豆组织培养方法，其特征在于：步骤(3)所述的诱导培养基一号由如下成分组成：以一升计算：常量元素为：NH₄NO₃750～850mg、KNO₃900～1000mg、Cal₂·2H₂O 200～250mg、MgSO₄·7H₂O 150～200mg、KH₂PO₄320～380mg；微量元素：KI 0.80～0.85mg、H₃BO₃6.0～6.5mg、MnSO₄·4H₂O 22.0～22.5mg、ZnSO₄·7H₂O 8.3～8.8mg、Na₂MnO₄·2H₂O 0.22～0.28mg、CuSO₄·5H₂O 0.022～0.028mg、CoCl₂·6H₂O 0.022～0.028mg、FeSO₄·7H₂O 27.5～28mg、Na₂-EDTA·2H₂O 37～37.5mg；有机成分：肌醇80～120mg、烟酸0.3～0.8mg、盐酸吡哆醇：维生素B60.3～0.8mg、盐酸硫胺素：维生素B10.3～0.8mg、甘氨酸1～3mg、蔗糖25～35g、马铃薯45～55g、琼脂3～8g、余量为蒸馏水；PH值5.8。

3.根据权利要求1所述一种红根野蚕豆组织培养方法，其特征在于：步骤(4)所述光照温室的光照强度为1500～2500lx，光照时间为5～10小时。