[发明专利]禽呼肠孤病毒σA蛋白及其相关生物材料的应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种禽呼肠孤病毒σA蛋白及其相关生物材料的应用，属于生物技术领域。

背景技术

真核细胞内存在多条信号转导通路，磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)信号通路在众多信号通路中发挥十分重要的作用，可通过其下游效应分子蛋白激酶B(Akt)来调控多种细胞功能，如细胞增殖与分化、抑制细胞凋亡等，病毒感染通常会干扰该信号通路。PI3K是由催化亚基p110和调节亚基p85所组成的二聚体蛋白，具有类脂激酶和蛋白激酶的双重活性。研究表明，病毒蛋白或细胞蛋白通过PXXP(P为脯氨酸，X为任意氨基酸)或YXXXM/YXXM(Y为酪氨酸，X为任意氨基酸，M为蛋氨酸)基序与P85结合，从而激活PI3K/Akt信号通路，使磷酸化的Akt(P-Akt)表达量升高，实现抑制细胞凋亡的发生。

大量的研究资料表明，当病毒侵入宿主细胞后，被感染的细胞能被宿主的免疫系统识别，并通过诱导细胞凋亡而对感染了病毒的细胞加以清除，从而限制病毒在细胞内的复制及传播。但是在选择压力的作用下，许多病毒已经进化出某些可以逃避细胞凋亡的机制，使得病毒在宿主细胞死亡之前能完成其复制周期，这些对抗措施通常是由病毒蛋白来介导的。许多病毒通过自身的某些蛋白与PI3K的P85调节亚基结合，进而激活PI3K/Akt信号通路，促进P-Akt的转录表达。P-Akt表达量的升高，可磷酸化许多信号蛋白，并通过这些蛋白调节与细胞生存、增殖、迁移、分化和凋亡有关的多条下游信号转导通路，如通过抑制促凋亡蛋白的活性，从而抑制凋亡刺激信号诱发的细胞凋亡，还可通过控制凋亡调节基因的表达而抑制细胞凋亡。

Labrada和Shih等的研究表明，禽呼肠孤病毒(Avian reovirus，ARV)引起感染细胞出现细胞凋亡是发生在其感染的中后期。Lin等使用ARV感染Vero细胞后，通过Western blot检测P-Akt的表达量，从病毒的角度证实了ARV感染的早期激活了PI3K/Akt信号通路，从而抑制了感染细胞的凋亡，以有利于ARV完成其复制周期。ARV怎样来启动PI3K/Akt信号通路，实现抑制感染细胞的凋亡，目前还不清楚，找出能激活PI3K/Akt信号通路的ARV物质，从细胞信号转导的角度揭示ARV的分子致病机制，可以为寻找抗ARV药物作用靶点提供新的思路。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是确定激活PI3K/Akt信号通路的ARV蛋白，进而可将其作为抗ARV药物的作用靶点。

为了解决以上技术问题，本发明提供禽呼肠孤病毒的σA蛋白或其相关生物材料在制备提高细胞内磷酸化的蛋白激酶B(P-Akt)的表达量的产品中的应用；

所述禽呼肠孤病毒的σA蛋白的相关生物材料，为下述B1)至B9)中的任一种：

B1)编码所述禽呼肠孤病毒的σA蛋白的核酸分子；

B2)含有B1)所述核酸分子的表达盒；

B3)含有B1)所述核酸分子的重组载体；

B4)含有B2)所述表达盒的重组载体；

B5)含有B1)所述核酸分子的重组微生物；

B6)含有B2)所述表达盒的重组微生物；

B7)含有B3)所述重组载体的重组微生物；

B8)含有B4)所述重组载体的重组微生物；

B9)表达禽呼肠孤病毒σA蛋白的重组细胞。

为了解决以上技术问题，本发明还提供禽呼肠孤病毒的σA蛋白或其相关的生物材料在制备激活细胞内PI3K/Akt信号通路产品中的应用；

所述禽呼肠孤病毒的σA蛋白的相关生物材料，为下述B1)至B9)中的任一种：

B1)编码所述禽呼肠孤病毒的σA蛋白的核酸分子；

B2)含有B1)所述核酸分子的表达盒；

B3)含有B1)所述核酸分子的重组载体；

B4)含有B2)所述表达盒的重组载体；

B5)含有B1)所述核酸分子的重组微生物；

B6)含有B2)所述表达盒的重组微生物；

B7)含有B3)所述重组载体的重组微生物；

B8)含有B4)所述重组载体的重组微生物；

B9)表达禽呼肠孤病毒σA蛋白的重组细胞。

上述任一所述的生物材料中，B1)所述的核酸分子为如下1)或2)或3)所示的核酸分子，即σA基因：

1)核苷酸序列是SEQ ID No.2的cDNA分子或DNA分子；