[发明专利]一种扩张床吸附(EBA)介质和其制备方法

权利要求书

1.一种用于扩张床的离子交换介质，其特征在于通过下述方法制备：

1)取2g抽干的琼脂糖凝胶、0.5g NaCl制成重量比为4％的琼脂糖-水悬浮液；将50g 4％琼脂糖-水悬浮液转移至烧瓶中，室温下搅拌混合15分钟，分别按照碳化钨与琼脂糖凝胶的质量比为0.2、0.4、0.6、0.8、1和2的配比添加碳化钨，所述碳化钨的平均颗粒大小9-11μm，然后以600rpm搅拌所得混合物15min，加热至93℃保持60min，作为水相备用；取200mL混合溶剂，所述混合溶剂含有体积比为10:1的石蜡和石油醚，往所述混合溶剂添加4％乳化剂得到混合液，所述乳化剂为10:4的Span80和Tween80；超声混合液5～10min，93℃水浴中预热作为油相备用；趁热将预热好的油相加入到水相中，3000rpm转速下搅拌30min，之后140-180rpm低速搅拌，以每分钟2℃速率降至室温，再继续将温度降至10℃以下；过滤收集琼脂糖-碳化钨复合物珠粒，用石油醚、无水乙醇、去离子水冲洗产物；

将过滤洗净后的琼脂糖-碳化钨复合物珠粒加入到等体积的二甲基亚砜的水溶液中，加入10mL环氧氯丙烷，20℃水浴条件下，150rpm搅拌30min；向反应体系中缓慢加入2g NaOH和0.2g NaBH₄，将温度升到45℃，150rpm搅拌12h，反应完成后，搅拌降至室温，过滤收集交联琼脂糖-碳化钨复合物珠粒，用丙酮、去离子水冲洗产物，以标准筛过筛，分离得粒径为50-250μm交联琼脂糖-碳化钨复合物珠粒；

2)通过烯丙基化、氧化和溴化依次反应活化步骤1)制备的交联琼脂糖-碳化钨复合物珠粒，获得活化的交联琼脂糖-碳化钨复合物珠粒；

3)在步骤2)活化的交联琼脂糖-碳化钨复合物珠粒上偶联3，3-二胺基二丙基胺或2-氯乙基二乙胺，形成所述用于扩张床的离子交换介质；

所述离子交换介质的湿密度为1.07～1.61g/ml，水重量比含量为88.3～51.2％，粒径范围为50～250μm，孔度为80.3-77.1％，所述孔度指介质微球内部孔隙占微球体积的百分率。

2.根据权利要求1所述的离子交换介质，其特征在于步骤2)中所述烯丙基化过程中，通过添加烯丙基缩水甘油醚开环联接烯丙基，烯丙基缩水甘油醚的添加量为1～4mmol/mL琼脂糖凝胶，以三氟化硼乙醚为催化剂，二氧六环为溶剂反应；

其中烯丙基化、氧化后的溴化过程中，滴加Br₂的量为0.03-0.1mL/ml琼脂糖凝胶。

3.根据权利要求1所述的离子交换介质，其特征在于步骤2)所述的氧化过程中，交联琼脂糖-碳化钨复合物珠粒内孔联接的烯丙基以油相保护，交联琼脂糖-碳化钨复合物珠粒外表层联接烯丙基以KMnO₄、H₂O₂水相氧化，油相保护使用的有机溶剂为苯、甲苯、乙苯、丙苯或者其中两种的混合物。

4.根据权利要求1所述的离子交换介质，其特征在于所述步骤3)中活化的交联琼脂糖-碳化钨复合物珠粒偶联3，3-二胺基二丙基胺配基过程中，3，3-二胺基二丙基胺的添加量为10-30mmoL/ml琼脂糖凝胶。

5.根据权利要求1所述的离子交换介质，其特征在于所述步骤3)中活化的交联琼脂糖-碳化钨复合物珠粒偶联2-氯乙基二乙胺过程中，将活化的交联琼脂糖-碳化钨复合物珠粒经过2.5-3.5mol/L NaOH溶液处理后偶联2-氯乙基二乙胺，2-氯乙基二乙胺的添加量为6-9mmoL/mL琼脂糖凝胶。

6.根据权利要求1所述的离子交换介质，其特征在于所述离子交换介质在0-800cm/h流速范围内扩张床相对稳定；静态吸附白蛋白的量为50～98mg/ml介质。

7.一种用于扩张床的离子交换介质的制备方法，包括下述步骤：

1)取2g抽干的琼脂糖凝胶、0.5g NaCl制成重量比为4％的琼脂糖-水悬浮液；将50g 4％琼脂糖-水悬浮液转移至烧瓶中，室温下搅拌混合15分钟，分别按照碳化钨与琼脂糖凝胶的质量比为0.2、0.4、0.6、0.8、1和2的配比添加碳化钨，所述碳化钨的平均颗粒大小9-11μm，然后以600rpm搅拌所得混合物15min，加热至93℃保持60min，作为水相备用；取200mL混合溶剂，所述混合溶剂含有体积比为10:1的石蜡和石油醚，往所述混合溶剂添加4％乳化剂得到混合液，所述乳化剂为10:4的Span80和Tween80；超声混合液5～10min，93℃水浴中预热作为油相备用；趁热将预热好的油相加入到水相中，3000rpm转速下搅拌30min，之后140-180rpm低速搅拌，以每分钟2℃速率降至室温，再继续将温度降至10℃以下；过滤收集琼脂糖-碳化钨复合物珠粒，用石油醚、无水乙醇、去离子水冲洗产物；

将洗净过滤后的琼脂糖-碳化钨复合物珠粒加入到等体积的二甲基亚砜的水溶液中，加入10mL环氧氯丙烷，20℃水浴条件下，150rpm搅拌30min；向反应体系中缓慢加入2g NaOH和0.2g NaBH₄，将温度升到45℃，150rpm搅拌12h，反应完成后，搅拌降至室温，过滤收集交联琼脂糖-碳化钨复合物珠粒，用丙酮、去离子水冲洗产物，以标准筛过筛，分离得粒径为50-250μm交联琼脂糖-碳化钨复合物珠粒；

2)通过烯丙基化、氧化和溴化依次反应活化步骤1)制备的交联琼脂糖-碳化钨复合物珠粒，获得活化的交联琼脂糖-碳化钨复合物珠粒；所述烯丙基化过程中，通过添加烯丙基缩水甘油醚开环联接烯丙基，烯丙基缩水甘油醚的添加量为1～4mmol/mL琼脂糖凝胶，以三氟化硼乙醚为催化剂，二氧六环为溶剂反应；所述氧化过程中，交联琼脂糖-碳化钨复合物珠粒内孔联接的烯丙基以油相保护，交联琼脂糖-碳化钨复合物珠粒外表层联接烯丙基以KMnO₄、H₂O₂水相氧化，油相保护使用的有机溶剂为苯、甲苯、乙苯、丙苯或者其中两种的混合物；

烯丙基化、氧化后的溴化过程中，滴加Br₂的量为0.03-0.1mL/ml琼脂糖凝胶；

3)在步骤2)活化的交联琼脂糖-碳化钨复合物珠粒上偶联3，3-二胺基二丙基胺或2-氯乙基二乙胺，形成所述用于扩张床的离子交换介质，活化的交联琼脂糖-碳化钨复合物珠粒偶联3，3-二胺基二丙基胺配基过程中，3，3-二胺基二丙基胺的添加量为10-30mmoL/ml琼脂糖凝胶；或者

步骤3)中活化的交联琼脂糖-碳化钨复合物珠粒偶联2-氯乙基二乙胺过程中，将活化的交联琼脂糖-碳化钨复合物珠粒经过2.5-3.5mol/L NaOH溶液处理后偶联2-氯乙基二乙胺，2-氯乙基二乙胺的添加量为6-9mmoL/mL琼脂糖凝胶。