[发明专利]一种豆干中二乙基黄的快速提取和检测方法

权利要求书

1.一种豆干中二乙基黄的快速提取和检测方法，其特征在于，包括下述步骤：

（1）确定二乙基黄特征拉曼峰：990cm^-1±3cm^-1为二乙基黄特征拉曼峰；

（2）绘制二乙基黄标准曲线；

（3）ASE对待测样品中二乙基黄的提取及待测样品溶液的制备：准确称取1.0-2.0g捣碎的待测豆干，与2-4g硅藻土完全混合；将样品混合物加入到已装有纤维素膜的不锈钢萃取池中，空余的体积用Ottawa沙子填满，然后旋上萃取池盖；以体积浓度为75%-85%的乙腈水溶液为萃取剂，用ASE提取待测样品中的二乙基黄，得到萃取液；再旋转蒸发浓缩萃取液至干，加入5mL乙腈溶解残渣，转移至离心管中离心，之后准确量取上清液，在上清液中加入氯化钠溶液，振荡、离心，上层清液即为待测样品溶液；

（4）取待测样品溶液，加入纳米增强试剂和无机盐凝聚剂，摇匀后，用激光拉曼光谱仪检测，得到样品的拉曼光谱图；所述纳米增强试剂为金纳米溶胶；

（5）定性测定：当990cm^-1±3cm^-1处存在明显特征拉曼峰时，豆干中含有二乙基黄；

（6）定量测定：对样品的拉曼光谱图进行基线调整；以990cm^-1±3cm^-1处的特征拉曼峰作为定量基准峰，对二乙基黄特征拉曼峰进行归一化处理；归一化后得到的二乙基黄特征拉曼峰强度根据二乙基黄标准曲线进行定量评估，通过下式计算出样品豆干中二乙基黄的含量X：

                                                

X—样品豆干中二乙基黄的含量，单位为毫克每千克；

c—从二乙基黄标准曲线得到的二乙基黄含量，单位为毫克每升；

V—乙腈体积，单位为毫升；

m—样品豆干称量质量，单位为克。

2.根据权利要求1所述的一种豆干中二乙基黄的快速提取和检测方法，其特征在于, 步骤（3）中ASE设定的提取程序为：温度80℃-100℃，压强 1300psi-1500psi，用萃取剂静态萃取5min，用池体积40%-60%的萃取剂冲洗萃取池，吹扫时间60s，循环萃取两次。

3.根据权利要求1或2所述的一种豆干中二乙基黄的快速提取和检测方法，其特征在于，步骤（3）ASE对待测样品中二乙基黄的提取：准确称取1.0-2.0g捣碎的待测豆干，与3g硅藻土完全混合；将样品混合物加入到已装有纤维素膜的11mL不锈钢萃取池中，空余的体积用Ottawa沙子填满，然后旋上萃取池盖；以体积浓度为80%的乙腈水溶液为萃取剂，用ASE提取待测样品中的二乙基黄，ASE设定的提取程序为：温度80℃，压强 1500psi，用萃取剂静态萃取5min，用池体积50%的萃取剂冲洗萃取池，吹扫时间60s，循环萃取两次，得到萃取液。

4.根据权利要求1所述的一种豆干中二乙基黄的快速提取和检测方法，其特征在于，步骤（3）中得到的萃取液，在60℃下旋转蒸发浓缩至干，加入5 mL乙腈溶解残渣，转移至离心管，离心机转速10000 r/min离心1min后，准确量取0.5mL上清液，加入0.1mL 2M氯化钠溶液，振荡30秒；10000r/min离心2min；上层清液即为待测样品溶液。

5.根据权利要求1所述的一种豆干中二乙基黄的快速提取和检测方法，其特征在于，步骤（4）中所述无机盐凝聚剂为氯化钠溶液或氯化钾溶液。

6.根据权利要求5所述的一种豆干中二乙基黄的快速提取和检测方法，其特征在于，步骤（4）中待测样品溶液的用量为0.02mL，纳米增强试剂的用量为0.50mL，无机盐凝聚剂的用量为0.10mL，其中无机盐凝聚剂为质量浓度为1%的氯化钠溶液或质量浓度为1%的氯化钾溶液。