[发明专利]一种快速检测核酸的方法在审
申请号: | 201510123527.8 | 申请日: | 2015-06-25 |
公开(公告)号: | CN104846068A | 公开(公告)日: | 2015-08-19 |
发明(设计)人: | 曹亮 | 申请(专利权)人: | 南京钟鼎生物技术有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 南京众联专利代理有限公司 32206 | 代理人: | 顾进 |
地址: | 210014 江苏省南京市六合*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 快速 检测 核酸 方法 | ||
1. 一种快速检测核酸的方法,其特征在于,包括以下各步骤:
(1)将预先包被5ug/ml 地高辛的聚苯乙烯微孔板作为核酸恒温扩增的反应容器;
(2)将目标基因的互补片段作为探针3’标记生物素,5’端标记地高辛;
(3)将标记后的探针通过生物素与链亲和素磁珠反应结合;
(4)带有标记探针的磁珠与随后加入的样品DNA/RNA在聚苯乙烯微孔板中采用ELISA法,55℃反应30min,通过N.BstNBI 切刻内切酶恒温扩增,探针末端地高辛随扩增次数被酶切割,溶液中地高辛浓度成比例增加;
(5)将磁珠吸出加入HRP标记的地高辛抗体,37℃反应30min,洗涤,加显色底物TMB,溶液显色通过检测吸光值计算DIG浓度,根据标准质粒的浓度从而确定目的基因的量。
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