[发明专利]一种香雪球组培快繁方法

说明书

技术领域

    本发明涉及农业生物技术中植物组织培养的方法，具体地说，涉及一种香雪球组培快繁方法。

背景技术

香雪球（Lobularia maritima）,又名庭芥、小白花，为十字花科香雪球属多年生草本或半灌木植物。香雪球原产于地中海沿岸,我国河北、山西、江苏、浙江、陕西、新疆等省区公园及花圃有栽培。香雪球花色5种,花开似绒毯,香气清新淡雅,耐干旱,是优美的岩石园花卉,也可作地被、花坛、花境边缘的镶边植物,盆栽或作窗台花卉。香雪球可代替草坪覆盖在地表,防止水土流失,吸附尘土、净化空气、减弱噪音、消除污染。香雪球是镍超富集植物,可耐受1%的镍金属，常用于保护生态环境和土壤修复。

香雪球通过种子繁殖,种子扁平细小,收集种子有一定困难,广泛栽种受季节的限制;香雪球也可扦插繁殖,但扦插易受病菌侵染而腐烂。通过植物离体培养可以在短时间内获得大量优质种苗,大大增强了繁殖系数,不受季节的环境条件的限制,这种繁殖方式弥补了传统繁殖的不足。因此，本发明以香雪球种子为外植体，通过初代芽诱导培养、增殖培养、生根培养、炼苗移栽等过程成功获得了香雪球离体再植株，建立香雪球组织培养快速繁殖技术体系，以促进香雪球商业化、规模化发展。

发明内容

    本发明的目的在于提供出一种香雪球组培快繁方法，本发明以香雪球种子为外植体，通过初代芽诱导培养、增殖培养、生根培养、炼苗移栽等过程成功获得了香雪球离体再植株，建立香雪球组织培养快速繁殖技术体系，从而实现了本发明的目的。

本发明的一种香雪球组培快繁方法，包括以下的步骤：

（1）无菌苗获得：选取饱满的香雪球种子，先用去离子水浸泡1～5h，滤干水分,在超净工作台上用75%酒精消毒30～60s,再0.1%升汞溶液消毒8～15min,最后用无菌水漂洗3～5次。消毒后将种子接种于萌发培养基进行种子萌发培养。接种后置于每天光照12～14小时，光照强度为2000～3000lx，置于培养温度为25～28℃，空气相对湿度为75%的条件下培养30天后统计萌发率。

    （2）诱导培养：将无菌苗1cm左右的茎段接种到诱导培养基上进行诱导培养。接种后置于每天光照12～14小时，光照强度为1000～2000lx，置于培养温度为25～28℃，空气相对湿度为75%的条件下培养60天后统计诱导。

（3）增殖培养：将诱导培养基得到的新芽切下并接种至增殖培养基中进行继代培养。接种后置于每天光照12～14小时，光照强度为2000～3000lx，置于培养温度为25～28℃，空气相对湿度为75%的条件下培养30天后统计增殖情况。

（4）生根培养：将生长健壮,高约5～7cm的香雪球苗转移到生根培养基中,诱导不定根的产生。接种后置于每天光照12～14小时，光照强度为2000～3000lx，置于培养温度为25～28℃，空气相对湿度为75%的条件下培养20天后统计生根情况

（5）炼苗移栽：组培苗在生根培养基上生长15～20天左右,根长到l～2cm时,先将培养瓶移出组培室,在室温下炼苗3～4天,除去玻璃瓶封口膜,往瓶内添加少量自来水,继续炼苗l～2天,然后取出香雪球幼苗,洗掉根上附着的培养基,再移栽到基质由蚯蚓土:珍珠岩＝1:1组成的基质中,注意保温保湿，移栽30天后统计成活率。

    上述步骤（1）所述的萌发培养基为：1/2MS+0.01～0.05mg/L NAA+15～30g/L蔗糖+3.5～6.0g/L琼脂，pH为5.4～5.8。

    上述步骤（2）所述的诱导培养基为：MS+1.0～3.0mg/L 6-BA+0.1～0.5mg/LNAA+15～30g/L蔗糖+3.5～6.0g/L琼脂，pH为5.4～5.8。

    上述步骤（3）所述的增殖培养基为：MS+0.1～1.0mg/L 6-BA+0.1～0.5mg/L NAA+0.5～1.0%活性炭+15～30g/L蔗糖+3.5～6.0g/L琼脂，pH为5.4～5.8。

    上述步骤（3）所述的生根培养基为：1/2MS+0.1～1.0mg/LIBA+0.5～1.0%活性炭+15～30g/L蔗糖+3.5～6.0g/L琼脂，pH为5.4～5.8。