[发明专利]用于检测人类红细胞Kidd血型基因分型的引物组及试剂盒

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，特别涉及一种用于检测人类红细胞Kidd血型基因分型的试剂盒（PCR-SSP法）。

背景技术

Kidd血型是一种稀有血型。1951年Allen在一新生儿溶血病患儿的母亲血清中发现一新的抗体，称抗-Jka，检出相应的Jka抗原。该母亲姓Kidd，故被称为Kidd 血型。1953年检出Kidd血型中的另一个抗原Jkb，家系调查表明这两个抗原受控于同一座位上的二个显性基因。1959年Pinkerton在菲律宾的西班牙-中国血统的后裔中，发现存在于Jk(a-b-)以外的所有红细胞上。

Kidd血型系统的决定基因位于18号染色体（18q12.3）的JK基因。该基因有一对共显性等位基因Jk和Jk，分别编码抗原Jk和Jk。1997年，国际输血协会(ISBT)确定Kidd血型系统(009)有三个抗原：即Jka(009001)，Jkb(009002)Jk3(009003)。

在不同种族中，Kidd血型分布有一定差异。白种人和黑人中Jka基因频率较高，Jk基因几乎不存在。东方人中Jkb基因一般高于Jka。

抗-Jka及抗-Jkb都可以引起急性溶血性输血反应HTR，特别是迟发性溶血性输血反应DHTR，约占据1/2。这至少部分是由于Kidd抗体，在初次测到后很少几个月内不再测到，病人再次输血后，需经再次免疫产生抗体。

发明内容

本发明的目的是：克服血清学检测试剂的价格昂贵，试剂不好购买等不足，提供一种免疫学方法能够简单方便的检测人类红细胞Kidd血型基因的引物组。

本发明的第二个目的是提供一种具有灵敏、特异、经济、简便、快速的用于检测人类红细胞Kidd血型基因的试剂盒。

一种用于检测人类红细胞Kidd血型基因的引物组，其特征是包括JK^a引物对，JK^b引物对及内参引物对。

所述JK^a的上下游引物位于Kidd的DNA参考序列的EXON8 818-838和Intron8 91-111位置，上、下游引物分别是序列表中SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。

所述JK^b的上下游引物位于Kidd的DNA参考序列的EXON8 818-838和Intron8 91-111位置，上、下游引物分别是序列表中SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。

 一种用于检测人类红细胞Kidd血型基因的试剂盒，其特征是包括包被有JK^a引物对，JK^b引物对及内参引物对的引物板和浓缩dNTP-Buffer。

所述JK^a的上下游引物位于Kidd的DNA参考序列的EXON8 818-838和Intron8 91-111位置，上、下游引物分别是序列表中SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。

所述JK^b的上下游引物位于Kidd的DNA参考序列的EXON8 818-838和Intron8 91-111位置，上、下游引物分别是序列表中SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。

附图说明

图 1为人类红细胞Kidd血型基因特异引物孔位图。

图 2为实验结果阴阳性判读图。

图 3 为人类红细胞Kidd血型基因测定结果分型读板纸。

图 4 为人类红细胞Kidd血型基因测定试剂盒电泳结果胶图。

具体实施方案

下面结合具体实施例对本发明做进一步说明。

实施例1。

依据美国国立生物技术信息中心基因库（NCBI Gene Bank）公开的Kidd等位基因序列，设计出用于检测人类红细胞Kidd血型基因的引物组，该引物组包括JK^a引物对，JK^b引物对及内参引物对。

实施例2。

一种用于检测人类红细胞Kidd血型基因的试剂盒，包括包被有JK^a引物对，JK^b引物对及内参引物对的引物板和浓缩dNTP-Buffer。

用于检测人类红细胞Kidd血型基因的试剂盒的制备方法是：