[发明专利]一种稻米香味基因的分子标记和应用

权利要求书

1.一种稻米香味基因的分子标记，其特征在于，所述分子标记由一对外引物Badh2-O-F和Badh2-O-R和一对内引物Badh2-WT-F、Badh2-E7-R组成，引物序列如SEQ ID NO：1～4所示。

2. 权利要求1所述分子标记在鉴定稻米香味性状和/或稻米香味基因badh2-E7基因型中的应用。

3. 权利要求1所述分子标记在水稻育种中的应用。

4. 利用权利要求1所述分子标记鉴定稻米香味基因badh2-E7基因型的方法。

5. 利用权利要求1所述分子标记鉴定稻米香味性状或同时鉴定稻米香味性状和稻米香味基因badh2-E7基因型的方法。

6. 根据权利要求4所述的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1. 待测样品DNA提取；

S2. 以样品DNA为模板，构建PCR反应体系，利用权利要求1所述分子标记进行PCR扩增；

S3. 分析PCR扩增后的产物，进行结果判定，所述结果判定为：若出现360bp和215bp条带，则表明待测样品的稻米香味基因badh2-E7为香味基因型；若出现188bp和368bp条带，则表明待测样品的稻米香味基因badh2-E7为纯合的无香味基因型；若出现360bp/368bp、188bp和215bp条带，则表明待测样品的稻米香味基因badh2-E7为杂合的无香味基因型。

7. 根据权利要求5所述的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1. 待测样品DNA提取；

S2. 以样品DNA为模板，构建PCR反应体系，利用权利要求1所述分子标记进行PCR扩增；

S3. 分析PCR扩增后的产物，进行结果判定，所述结果判定为：若出现360bp和215bp条带，则表明待测样品的稻米香味基因badh2-E7为香味基因型，待测样品为香型稻米；若出现188bp和368bp条带，则表明待测样品的稻米香味基因badh2-E7为纯合的无香味基因型，待测样品为非香型稻米；若出现360bp/368bp、188bp和215bp条带，则表明待测样品的稻米香味基因badh2-E7为杂合的无香味基因型，待测样品为非香型稻米。

8. 根据权利要求6或7所述的方法，其特征在于，所述PCR反应体系为：DNA模板1.0 uL、Badh2-WT-F 0.3 uL、Badh2-E7-R 0.3 uL、Badh2-O-F0.3 uL、Badh2-O-R 0.3 uL、2×Power Taq PCR Master Mix 7.5uL，用双蒸灭菌水补足至15uL。

9. 根据权利要求6或7所述的方法，其特征在于，所述PCR扩增的条件为：94℃预变性5min, 94℃30s，57℃30s，72℃45s共运行35个循环，最后72℃延伸10min。