[发明专利]用于制备安丝菌素的方法

权利要求书

1.一种用于制备精制安丝菌素的工艺，其包括如下步骤：

1)在液体培养基中培养产安丝菌素的微生物，其中所述产安丝菌素的微生物是珍贵橙色束丝放线菌ATCC 31565或珍贵橙色束丝放线菌PF4-4(ATCC PTA-3921)，其中所述培养是在pH 6.5-8的培养基中和15℃-35℃的温度下，且其中在所述培养期间提供醇类或醛类以促进安丝菌素的C-3酯侧链的形成；

2)通过固相萃取将安丝菌素从培养基中萃取到选自Amberlite XAD-4、XAD-16、Diaion HP20、HP21和Sepabeads SP825、SP850、SP70、SP700的疏水性树脂上，其中所述萃取在6-7的pH和30℃-45℃的温度下进行；

3)使用有机溶剂或混有水的有机溶剂，从树脂中等度洗脱或梯度洗脱安丝菌素；

4)浓缩经萃取的安丝菌素；以及

5)任选通过在硅胶或氧化铝上吸附层析来纯化安丝菌素，其中所述安丝菌素通过溶剂梯度从柱中洗脱，该溶剂梯度初始为乙酸乙酯和己烷的混合物并不断增加甲醇的量，

其中所述安丝菌素具有以下结构：

其中R是H、COCH₃、COCH₂CH₃、COCH(CH₃)₂、COCH₂CH₂CH₃、COCH₂CH(CH₃)₂或COCH₂CH₂CH₂CH₃。

2.如权利要求1所述的工艺，其中所述安丝菌素任选地通过使用乙酸乙酯溶解产物，接着添加庚烷或己烷以结晶析出纯的产物的析晶来进行纯化。

3.如权利要求1所述的工艺，其中所述安丝菌素任选地通过在硅胶或氧化铝上的吸附层析步骤，接着使用乙酸乙酯溶解产物和随后添加庚烷或己烷以结晶析出纯的产物的析晶来进行纯化。

4.如权利要求1所述的工艺，其中所述安丝菌素任选地通过使用乙酸乙酯溶解产物和随后添加庚烷或己烷以结晶析出纯的产物的析晶，接着在硅胶或氧化铝上的吸附层析步骤来进行纯化。

5.一种用于制备精制安丝菌素的工艺，其包括如下步骤：

1)在含有疏水性树脂的液体培养基中培养产安丝菌素的微生物，其中所述产安丝菌素的微生物是珍贵橙色束丝放线菌ATCC 31565或珍贵橙色束丝放线菌PF4-4(ATCC PTA-3921)，其中所述培养是在pH 6.5-8的培养基中和15℃-35℃的温度下，其中在所述培养期间提供醇类或醛类以促进安丝菌素的C-3酯侧链的形成，且其中所述树脂选自Amberlite XAD-4、XAD-16、Diaion HP20、HP21和Sepabeads SP825、SP850、SP70、SP700；

2)通过过滤或离心分离树脂；

3)使用有机溶剂或混有水的一种或多种有机溶剂洗脱安丝菌素；

4)浓缩经萃取的安丝菌素；以及

5)任选通过在硅胶或氧化铝上吸附层析来纯化安丝菌素，其中所述安丝菌素通过溶剂梯度从柱中洗脱，该溶剂梯度初始为乙酸乙酯和己烷的混合物并不断增加甲醇的量，

其中所述安丝菌素具有以下结构：

其中R是H、COCH₃、COCH₂CH₃、COCH(CH₃)₂、COCH₂CH₂CH₃、COCH₂CH(CH₃)₂或COCH₂CH₂CH₂CH₃。

6.如权利要求5所述的工艺，其中所述安丝菌素任选地通过使用乙酸乙酯溶解产物，接着添加庚烷或己烷以结晶析出纯的产物的析晶来进行纯化。

7.如权利要求5所述的工艺，其中所述安丝菌素任选地通过在硅胶或氧化铝上的吸附层析步骤，接着使用乙酸乙酯溶解产物和随后添加庚烷或己烷以结晶析出纯的产物的析晶来进行纯化。