[发明专利]一种用于提取三七素的分子印迹聚合物的制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种药物技术领域的方法，具体是一种用于提取三七素的分子印迹聚合物的制备方法和应用。

背景技术

名贵中药“三七”具有活血化瘀、消肿止痛、舒筋活络等功能，其中尤以止血功能著称，为著名中药制剂“云南白药”原料之一。《本草纲目》称“三七止血散血定痛”，三七具有“止血不留瘀，化瘀不伤正”的美名，实为理血的要药。历代医家将三七作为止血上品，广泛用于跌打损伤、内伤出血等内外出血症。三七的水溶性成分三七素，是从三七根中分离的一种特殊的氨基酸，它能缩短小鼠的凝血时间，并使血小板数量显著增加，但目前还没有三七素制剂的生产和使用。

三七中三七素的提取工艺文献报道与已有专利均采用醇提、残渣水提取、过滤、浓缩、正丁醇萃取、水提液上树脂层析，如中国专利CN1267665A、中国专利CN1166679C、中国专利CN1865232A等。这些报道工艺基本一致，特别是在提取工艺中均采用Sephadex LH-20以及CM Sephadex C-25树脂柱，而此两种树脂均价格昂贵，成本较高，且处理样品耗时，操作技术要求高，若要得到高纯度的三七素，需要更多的萃取、结晶，是工业化生产的难题。

分子印迹技术(Molecular imprinting technology,MIT)是为获得在空间结构和结合点位上与某一分子(通常称为模板分子)完全匹配的聚合物的实验制备技术，属于高分子化学、材料科学、生物化学、分析化学等之间的一个交叉学科领域。分子印迹聚合物(Molecular imprinting polymer,MIPs)是指以目标分子为模板分子，将具有结构互补的功能化聚合物单体通过共价或非共价的方式与模板分子结合，加入交联剂进行聚合反应，反应完成后将模板分子提取出来后形成的一类有固定空穴大小和形状及有确定排列功能团的交联高聚物。因为制备的材料有着极高的选择性及卓越的分子识别性能，很快在固相萃取、人工酶学、手性拆分、生物传感器、不对称催化等方面得到了广泛的应用。在天然活性物质分离领域，所报道的分子印迹技术多用于黄酮类、多元酚类、生物碱类、甾体类和香豆素类的分离纯化。

目前尚未见利用分子印迹技术从三七中提取三七素的方法的报道。主要存在以下的原因:模板“三七素”价格昂贵,，考虑成本与收入，利用模板“三七素”来大规模制备分子印迹聚合物是不合理的，若是使用一般的物质代替三七素，将会出现分子印迹聚合物对三七素的选择性较差，制得三七素的纯度非常低，迄今还没有一种价格便宜的物质来代替三七素，并且得到的分子印迹聚合物选择性强，可用于定向富集三七素。

发明内容

本发明的目的是提供一种用于从三七中提取三七素的分子印迹聚合物和方法，为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

本发明提供了一种用于提取三七素的印迹聚合物的制备方法，包括如下步骤：

1)将假模板分子、功能单体、交联剂、引发剂、制孔剂按质量比为1～3:2～6:15～30:0.05～0.10:20～70混合制成均相体系，超声脱气、在氮气保护下，于40～60℃聚合18～24小时；得到带模板分子的聚合物；

2)将步骤1)制备的聚合物磨成粉末，过150～200目筛，然后用醇与有机酸的混合溶液进行淋洗，对淋洗液进行高效液相检测，直至无模板物质检出为止，干燥，即得三七素分子印迹聚合物。

进一步地，所述假模板分子为苯丙酮酸、DL-酪氨酸或甘氨酸-DL-亮氨酸，优选为甘氨酸-DL-亮氨酸。

进一步地，所述的功能单体为丙烯酰胺、甲基丙烯酸或4-乙烯基吡啶，优选为4-乙烯基吡啶。

进一步地，所述的交联剂为N,N-二甲基二丙烯酰胺、二甲基丙烯酸乙二醇酯或二乙烯基苯，优选为二甲基丙烯酸乙二醇酯。

进一步地，所述的制孔剂为氯仿；所述引发剂为偶氮二异丁腈或偶氮二异戊腈，优选为偶氮二异丁腈。

进一步地，所述醇与有机酸的混合溶液为体积分数为10％～20％的乙酸甲醇溶液，其中，乙酸和甲醇的摩尔比为。

进一步地，所述干燥处理的条件为真空下50～65℃烘干。

上述任一所述方法制备的用于提取三七素的印迹聚合物。

本发明还提供了上述用于提取三七素的印迹聚合物在提取三七素中的应用，其特征在于，包括如下步骤：以上述的用于提取三七素的分子印迹聚合物作柱层析填料装柱，然后用三七根提取液上柱，再用体积比为10：1的正己烷/醇混合溶液淋洗，最后层析柱用醇洗脱，流出液为三七素。

进一步地，所述的醇为乙醇、异丙醇、正丙醇或正丁醇。