[发明专利]一种海洋水产养殖用载体固定化抑菌型水质净化剂及其制备方法有效
申请号: | 201510128508.4 | 申请日: | 2015-03-23 |
公开(公告)号: | CN104789548B | 公开(公告)日: | 2017-07-21 |
发明(设计)人: | 徐永平;车鉴;李淑英;李晓宇;王丽丽;王熙涛;张建成;阳桂菊 | 申请(专利权)人: | 大连理工大学 |
主分类号: | C12N11/14 | 分类号: | C12N11/14;C12N11/02;C02F3/34;C12R1/125;C12R1/01 |
代理公司: | 大连东方专利代理有限责任公司21212 | 代理人: | 贾汉生,李馨 |
地址: | 116024 辽*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 海洋 水产 养殖 载体 固定 化抑菌型 水质 净化剂 及其 制备 方法 | ||
1.一种海洋水产养殖用载体固定化抑菌型水质净化剂,是将枯草芽孢杆菌YB-01 CGMCC-No.9756和侧孢短芽孢杆菌YB-02 CGMCC-No.9757的混合发酵菌液吸附固化到复合载体上制备得到的,其中所述复合载体由硅藻土粉和玉米芯粉按重量比2~4:1混合组成。
2.根据利要求1所述的载体固定化抑菌型水质净化剂,其特征在于,所述的混合发酵菌液与复合载体的重量比为15~35:1。
3.根据权利要求1所述的载体固定化抑菌型水质净化剂,其特征在于,所述的混合发酵菌液中菌体的镜检芽孢形成率为80~85%。
4.如权利要求1所述的载体固定化抑菌型水质净化剂的制备方法,包括以下步骤:
(1)益生菌种子液制备:将斜面培养的枯草芽孢杆菌YB-01和侧孢短芽孢杆菌YB-02,分别接种至种子培养基中,在pH 7.2~7.5,26~28℃恒温摇床培养,得枯草芽孢杆菌YB-01益生菌种子液和侧孢短芽孢杆菌YB-02益生菌种子液,按体积比1:1~1.5混合,得混合益生菌种子液;
(2)益生菌液态发酵培养:将混合益生菌种子液按5~10%的体积比接种至发酵培养基中,在0.1MPa,温度28~30℃,溶氧≥30%的条件下,进行发酵,初始搅拌速度150rpm,2h后为200rpm,3h后为250rpm,4h后为300rpm,得发酵菌液;
(3)载体固定化处理:向步骤(2)的发酵菌液中,加入复合载体,在搅拌下进行吸附固定化处理1~3h,离心,收集固定化载体菌体复合物,50~55℃干燥处理至半干后,自然晾干,粉碎,得终产品;
其中,步骤(1)所述的种子培养基的组成为:蛋白胨10g,牛肉膏粉3g,氯化钠30g,用蒸馏水定容至1000ml,pH7.2~7.5;步骤(2)所述的发酵培养基的组成为:玉米粉150g,豆饼粉250g,中温淀粉酶3.5g,中性蛋白酶2.5g,玉米浆40g,葡萄糖25g,硫酸镁10g,用陈海水定容至5L,pH7.2~7.5;步骤(3)所述的发酵菌液和复合载体的重量比为15~35:1,所述的复合载体由硅藻土粉和玉米芯粉按照重量比2~4:1组成。
5.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)中所述的枯草芽孢杆菌YB-01益生菌种子液和侧孢短芽孢杆菌YB-02益生菌种子液中的菌体浓度均为2~3×108cfu/ml。
6.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,步骤(2)中所述的发酵菌液中菌体的镜检芽孢形成率为80~85%。
7.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,所述的硅藻土粉的粒径为100~150目,玉米芯粉的粒径为60~100目。
8.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,步骤(3)中所述的终产品的水份含量为3~5%,终产品中菌体终浓度≧5×109cfu/g。
9.如权利要求1所述的载体固定化抑菌型水质净化剂在海洋水产养殖中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于,所述海洋水产养殖为海参养殖、大菱鲆养殖和红鳍东方鲀养殖。
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