[发明专利]可用于检测与大肠癌相关的SLCl9A1基因启动子区甲基化程度的试剂盒及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种辅助诊断大肠癌的检测试剂盒，尤其是涉及一种可用于检测与大肠癌相关的SLCl9A1基因启动子区甲基化程度的试剂盒及其应用

背景技术

大肠癌(Colorectal Cancer，CRC)又称结直肠癌，是消化系统中常见的恶性肿瘤。目前研究表明大肠癌是大肠黏膜上皮细胞在遗传和环境等多种复杂的因素共同作用下，发生遗传和表观遗传的改变而获得无限增殖，躲避凋亡程序等能力，从而在局部形成肿块。近年来，随着人们生活水平的提高，饮食习惯与结构的改变，加之人口老龄化趋势的影响，我国大肠癌的发病率和死亡率增长迅速，而且，发病年龄明显提前。世界卫生组织(WHO)发布的《全球癌症报告2014》显示中国癌症新增病例和死亡人数的绝对数值位居世界首位。其中以胃癌、食道癌、大肠癌为代表的消化道癌症威胁最为显著。尽管目前手术方式和辅助治疗手段不断改进，大肠癌的患者的术后生存情况有了较大的改善，但是CRC患者的五年总体生存率仍旧不高，其中最重要的一个因素就是，许多患者在疾病发生的早期没有得到及时的诊断，后期又因发生转移，而无法进行手术治疗。发生淋巴结转移的大肠癌患者应用伊立替康加氟嘧啶化疗药物，缩小肿瘤大小，使其能够达手术指针。但是只有30％-50％的患者对该药物有明显的疗效。因此，有必要探索其他分子指标检测，判断患者对药物的反应性，及早选择恰当的治疗方案，提高大肠癌患者总体生存率。

溶质运载蛋白家族成员19A1(solute carrier family 19,member 1,SLCl9A1)位于21号染色(chr21:46934629-46954529)，其编码叶酸载体蛋白能介导细胞对叶酸的吸收，调控细胞内叶酸的浓度。有研究表明，处于高浓度叶酸的大肠癌细胞，对化疗药物的敏感性减弱。并且有报道，溶质运载蛋白家族成员19A1(solute carrier family 19,member 1,SLCl9A1)基因的多态性与大肠癌患者对化疗药的敏感性相关，可用于对大肠癌患者的预后评价。目前，国内外尚无关于大肠癌与溶质运载蛋白家族成员19A1(solute carrier family 19,member 1,SLCl9A1)基因启动子区甲基化相关性研究和在大肠癌中用于检测溶质运载蛋白家族成员19A1(solute carrier family 19,member 1,SLCl9A1)基因启动子区甲基化程度的检测试剂盒相关研究报道。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种检测方便、针对性强、检测准确率高的可用于检测与大肠癌相关的SLCl9A1基因启动子区甲基化程度的试剂盒及其应用，其中基因SLCl9A1甲基化水平与大肠癌的患病率呈正相关，可通过对样品DNA甲基化水平测定辅助诊断大肠癌。

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：一种可用于检测与大肠癌相关的SLCL9A1基因启动子区甲基化程度的试剂盒，包括SLCl9A1基因启动子区甲基化特异性扩增上游引物、下游引物及其未甲基化特异性扩增上游引物和下游引物，其中所述的甲基化特异性扩增上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示：

5’-TTGTTGTAGCGGTGTTGGAAGG-3’；

所述的甲基化特异性扩增下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示：

5’-TCCGCCGCAACCTACGAAT-3’；

所述的未甲基化特异性扩增上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示：

5’-TTTGTTGTAGTGGTGTTGGAAG-3’；

所述的未甲基化特异性扩增下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示：

5’-TTCCACCACAACCTACAAAT-3’。

一种可用于检测与大肠癌相关的SLCl9A1基因启动子区甲基化程度的试剂盒的应用，该试剂盒可用于大肠癌辅助检测、诊断或药物治疗中。