[发明专利]用米曲霉发酵花生粕制备呈味肽和呈味氨基酸的方法及其应用

权利要求书

1.一种用米曲霉发酵花生粕制备呈味肽和呈味氨基酸的方法，其特征在于：所述制备方法的具体步骤如下：

（1）米曲霉AS3.95孢子紫外诱变：

取2 mL米曲霉AS3.95悬液于直径为12 cm的无菌培养皿中，液体厚度在1 mm以内，在距30 w紫外灯30 cm处照射，同时晃动培养皿，稀释后涂布在酪蛋白平板培养基上，37 ℃培养；

（2）米曲霉突变株初筛：

将米曲霉突变株在酪蛋白平板培养基培养48 h，以米曲霉AS3.95为对照，挑选单菌落透明圈直径和菌落直径的比值K增大的菌株进行复筛；

（3）米曲霉突变株复筛：

将通过初筛的菌株制成的单孢子悬液接种到霉菌培养基，30-40 ℃培养48-72 h后进行蛋白酶活性测定；

（4）米曲霉突变株发酵花生粕：

在花生粕与麸皮的培养基中，按10-20倍重量添加营养盐溶液，接种量的体积比为1-20%，在温度20-45℃下于发酵罐中发酵72-160 h；

（5）发酵完成后收集发酵液，进一步加工为液体或固体的呈味肽和呈味氨基酸。

2.根据权利要求1 所述的用米曲霉发酵花生粕制备呈味肽和呈味氨基酸的方法，其特征在于：所述花生粕预先过40-60 目筛。

3.根据权利要求1 所述的用米曲霉发酵花生粕制备呈味肽和呈味氨基酸的方法，其特征在于：步骤（1）所述的米曲霉培养基为：在121℃条件下灭菌20 min的马铃薯培养基 PDA；所述的米曲霉AS3.95孢子紫外诱变，30 w紫外灯在30 cm处照射紫外线时间80-120 s。

4.根据权利要求1 所述的用米曲霉发酵花生粕制备呈味肽和呈味氨基酸的方法，其特征在于：步骤（2）所述米曲霉突变株初筛时选取的K值范围为1.3-1.8的菌株进行复筛。

5.根据权利要求1 所述的用米曲霉发酵花生粕制备呈味肽和呈味氨基酸的方法，其特征在于：步骤（3）所述米曲霉突变株复筛后菌株的蛋白酶活性在400-600 U/g。

6.根据权利要求1 所述的用米曲霉发酵花生粕制备呈味肽和呈味氨基酸的方法，其特征在于：步骤（4）所述米曲霉突变株发酵花生粕的物料重量比范围：花生粕:麸皮为6:2-10:2；营养盐溶液按重量配置为：1 千克水中含有(NH₄) ₂SO₄ 0. 5%、KH₂PO₄ 0. 5%、尿素1%、葡萄糖1%，利用6 mol/L HCl 调整pH至5.0。

7.一种采用权利要求1 所述方法制备出的呈味肽和呈味氨基酸的应用，其特征在于：所述呈味肽和呈味氨基酸用于制备调味品或制备饲料添加剂。