[发明专利]核酸分析装置以及核酸分析方法在审

专利信息
申请号: 201510136543.0 申请日: 2015-03-26
公开(公告)号: CN104946526A 公开(公告)日: 2015-09-30
发明(设计)人: 村山寿郎;高城富美男 申请(专利权)人: 精工爱普生株式会社
主分类号: C12M1/38 分类号: C12M1/38;C12M1/34;C12Q1/68
代理公司: 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 代理人: 李洋;苏琳琳
地址: 日本*** 国省代码: 日本;JP
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摘要:
搜索关键词: 核酸 分析 装置 以及 方法
【说明书】:

技术领域

本发明涉及核酸分析装置以及核酸分析方法。

背景技术

近年来,因利用遗传基因技术的发展,遗传基因诊断、遗传基因治疗等利用了遗传基因的医疗受到关注。另外,在农业和畜牧业领域,也开发出较多将遗传基因用于品种辨别、品种改进的方法。作为用于利用遗传基因的技术,PCR(Polymerase Chain Reaction:聚合酶链反应)等技术广泛普及。时至今日,PCR成为在生物体物质的信息解析中必不可缺的技术。PCR是通过对含有作为扩增的对象的核酸(目标核酸)以及试剂的溶液(反应液)实施热循环使目标核酸扩增的方法。作为PCR的热循环,一般为以两阶段或者三阶段的温度实施热循环的方法。

另一方面,对于医疗现场中的流感所代表的传染病的诊断,在现状中,使用免疫层析(immunochromato)等简易检查套件是主流。但是,在这种简易检查中,有可能精度不够,希望将能够获得更高检查精度的PCR用于传染病的诊断。另外,在医疗机构中的一般门诊等中,由于诊察的时间受限的关系,能够花费在检查的时间被限制在短时间。因此,例如,对于流感的检查,现状是牺牲了检查的精度,通过简易的免疫层析等的检查将时间缩短来进行。

根据这种情况,为了实现在医疗现场通过能够获得更高精度的PCR进行的检查,需要缩短反应所需要的时间。作为用于在短时间进行PCR的反应的装置,例如在专利文献1中公开了如下生物体样品反应装置,即,通过使填充有反应液以及未与反应液混和并且比反应液比重小的液体的生物体样品反应用芯片,绕水平方向的旋转轴旋转,使反应液移动从而实施热循环(专利文献1)。另外,作为PCR的方法,公开了使用磁珠的方法(专利文献2)、将磁珠作为液滴的移动机构来使用并且使基板上的在温度变化区域的液滴移动从而进行PCR的热循环的方法(专利文献3)等的。

但是,在现有的PCR装置中,无法调查扩增了的DNA的变异,对于定制医疗、细菌的耐药性的获得,无法容易对应。

专利文献1:日本特开2009-136250号公报

专利文献2:日本特开2009-207459号公报

专利文献3:日本特开2008-012490号公报

发明内容

本发明的目的在于提供在使核酸扩增以后能够简便地检测出其变异的核酸扩增装置。

本发明的一个实施方式是如下核酸分析装置,即,该核酸分析装置具备:安装部,其能够安装核酸扩增反应容器;第一加热器,其对上述核酸扩增反应容器的第一部分进行加热;第二加热器,其对上述核酸扩增反应容器的第二部分进行加热;旋转机构,其使上述核酸扩增反应容器与上述加热器一体地旋转;加热器控制部,其控制上述加热器;旋转机构控制部,其控制上述旋转机构;荧光测定器,其测定荧光;以及核酸融解曲线解析部,其分析核酸的融解曲线,上述核酸扩增反应容器含有核酸扩增反应溶液以及与核酸扩增反应溶液相分离的油,上述旋转机构控制部在上述核酸扩增反应容器中上述核酸扩增反应循环进行的期间,以上述核酸扩增反应容器的上述第一部分处于与上述第二部分相比相对于重力作用的方向靠下的位置的第一配置、和上述第二部分处于与上述第一部分相比相对于重力作用的方向靠下的位置的第二配置交替的方式,使上述核酸扩增反应容器旋转,并且在上述核酸扩增反应循环结束后,控制上述旋转机构使上述核酸扩增反应容器成为上述第二配置,上述加热器控制部在上述核酸扩增反应循环进行的期间,控制上述第一以及第二加热器使上述第一部分成为第一温度,使上述第二部分成为第二温度,在上述核酸扩增反应循环结束后,控制上述第二加热器使上述第二部分的温度随时间经过而升温,荧光测定器在上述第二部分的温度上升期间,测定从通过上述核酸扩增反应循环扩增了的核酸放出的荧光,上述核酸融解曲线解析部对从通过上述荧光测定器测定的荧光获得的核酸融解曲线进行解析。另外,上述核酸扩增反应容器也可以具备管,该管在内部依次具备:第一液柱,其由第一油构成;第二液柱,其由与油相分离并且清洗结合有核酸的核酸结合性固相载体的清洗液构成;第三液柱,其由第二油构成;第四液柱,其由若与油混合则相分离并且从结合有核酸的核酸结合性固相载体将上述核酸溶出的溶出液构成;以及第五液柱,其由第三油构成,上述核酸扩增反应容器与上述管的第五液柱侧连通。

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