[发明专利]四环素类抗生素或其药用盐在制备抗肠病毒药物中的应用

说明书

技术领域

本发明属于医药新用途领域。更具体地，涉及一系列四环素类抗生素或其药用盐在制备抗肠病毒药物中的新用途。

背景技术

肠病毒是一种主要生长于肠道的RNA病毒，在生化特性、流行病学及致病原因上具有许多共同点，主要包括：柯萨奇病毒(Coxsackievirus,CAV)、伊科病毒(Echovirus)、脊髓灰质炎病毒和肠病毒68-71型。肠病毒具有高度传染性，人类是唯一宿主及唯一感染源。其中肠病毒71型(Enterovirus 71，EV71)，是导致手足口病的主要病原体之一。成人对EV71多具有免疫性，婴幼儿对EV71易感。目前，对于感染EV71且病情严重的病人，主要是采用一般支持疗法和对症治疗，在抗病毒方面还没有特异、高效的抗病毒药物。

四环素类抗生素主要包括四环素、金霉素、土霉素、地美环素、强力霉素、美他环素、米诺环素和替加环素等，基本母核为氢化骈四苯。四环素类抗生素主要作用于细菌的30S rRNA，通过抑制氨酰-tRNA结合到核糖体的A位上而抑制细菌蛋白质合成，临床上主要用来治疗多种细菌和衣原体、支原体、立克次氏体引起的感染。除抑菌作用外，四环素类抗生素还具有广泛的非抗生素活性，如：抗炎、抗凋亡、抗氧化、抗金属蛋白酶、抗癌等，已作为神经保护剂用于脑卒中、多发性硬化等多种急慢性神经系统疾病的临床治疗(Yrjanheikki J,et al.PNAS,1998,95:15769；Laml Y,et al.Neurology.2007,69:1404；Zabad RK,et al.Mult Scler.2007,13:517)。目前，对四环素类抗生素的抗病毒谱和抗病毒机制还知之甚少。致病性病毒种类众多，受限于抗病毒药物的特异性作用靶位和耐药性问题，目前可用的抗病毒药物种类很少，尤其是广谱抗病毒药物非常缺乏。新药研制耗时长、需要高昂的人力和经济投入，老药新用则为新药研发另辟蹊径。作为一类价格低廉、使用时间较长的老药，研究四环素类抗生素是否具有广谱的抗病毒效果、分析比较不同四环素药物的抗病毒活性强弱以及对其进行结构改造以获得抗病毒效果更好的四环素衍生物新药，对于抗病毒治疗具有重要意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种四环素类抗生素或其可药用盐的新用途，即在制备抗肠病毒药物中的应用。尤其是四环素类抗生素或其可药用盐在抗肠病毒复制、保护细胞免受病毒感染的抗病毒药物制备方面的应用。

为达到上述目的，本发明采取的技术方案为：

本发明涉及的四环素类抗生素包括但不限于，四环素、金霉素、地美环素(去甲金霉素)、土霉素及半合成产物强力霉素(多西环素)、美他环素(甲烯土霉素)、米诺环素(二甲胺四环素)或替加环素。本发明涉及的四环素类抗生素药用盐优选为盐酸盐。根据实验，发明人认为其它含有氢化骈四苯母核的化合物也同样具有抗肠病毒活性。

在本发明的一个实施方案中，本发明所检测的病毒为EV71，在不同药物浓度下，发明人通过观察病毒引起的细胞病变效应、流式分析病毒基因组携带的报告基因GFP的表达情况以及空斑减数法，评价了上述八种四环素类抗生素对EV71复制是否具有抑制作用和对宿主细胞是否具有保护作用；在相同药物摩尔浓度下比较了不同四环素药物之间的抗病毒效应的强弱，并分析了药物的抗病毒活性与化合物结构特点之间的关系。实施方案中所涉及的八种药物在低病毒滴度感染情况下都表现出体外抗病毒活性，空斑减数结果显示IC50≤1.36μM；在高病毒滴度(MOI＝0.1)感染的情况下，八种四环素药物抗病毒活性有些差异，其中四环素和替加环素的抗病毒作用最强、降低细胞病变效应最显著，流式分析结果显示IC50分别为12.69和28.16μM。

因此，本发明要求保护具有氢化骈四苯母核的这一类化合物在制备抗肠病毒药物中的应用。优选的，本发明要求保护具有氢化骈四苯母核的这一类化合物在制备抗肠病毒71药物中的应用。此外，由于EV71感染主要引起婴幼儿手足口病，根据手足口病诊疗指南(2013年版)，目前主要采取隔离和对症治疗，并无有效的针对性抗病毒药物。由于四环素类药物容易沉积于婴幼儿的骨骼和牙齿组织中、影响骨骼正常发育，因此8岁以下儿童禁止口服和注射使用。考虑到手足口病主要症状为手、足、口腔等部位的斑丘疹、疱疹，直接或间接接触是一条重要的传播途径，因此，本发明所述药物优选为皮肤外用的局部施用制剂，例如软膏剂，用于手足口病的初期治疗、阻断病毒的传播。

本发明的有益效果：