[发明专利]一种二联手足口病灭活疫苗及其制备方法

权利要求书

1.一种人肠道71型病毒株CC-09，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.7753。

2.一种柯萨奇A16型病毒株CC-16，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.7752。

3.一种手足口病疫苗，其特征在于，由保藏编号为CGMCC No.7753的人肠道71型病毒株CC-09和保藏编号为CGMCC No.7752的柯萨奇A16型病毒株CC-16制备得到。

4.如权利要求3所述的手足口病疫苗，其特征在于，所述疫苗为二联灭活疫苗。

5.一种二联手足口病灭活疫苗的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1：将保藏编号为CGMCC No.7753的人肠道71型病毒株CC-09和保藏编号为CGMCC No.7752的柯萨奇A16型病毒株CC-16分别接种于扩大传代培养的Vero细胞或人胚肺二倍体细胞中培养；

步骤2：分别收获两种病毒培养液，除杂质后浓缩、灭活、纯化得到两种病毒原液；

步骤3：取步骤2制备的两种病毒原液除菌，混合即得所述二联手足口病灭活疫苗。

6.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤1所述培养为33℃～36℃培养72～120小时。

7.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤2所述灭活为用甲醛溶液或β-丙内酯溶液灭活。

8.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤2所述纯化为阴离子交换层析、分子筛凝胶过滤层析、复合模式介质层析中的一种或多种。

9.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤3所述混合为将除菌后的两种病毒原液混合后吸附佐剂；或者为将除菌后的两种病毒原液分别吸附佐剂然后再混合。

10.如权利要求9所述的制备方法，其特征在于，步骤3所述佐剂为氢氧化铝溶液。