[发明专利]一种树突状细胞肿瘤疫苗及其制备方法

权利要求书

1.一种肿瘤细胞致敏DC肿瘤疫苗的制备方法，其特征在于：用含抑肽酶和亮抑蛋白酶肽的RPMI-1640重悬胸腹水离心过滤后的单细胞悬液；将贴壁培养的DC细胞加入上述肿瘤相关全抗原单细胞悬液，加入rhTNF-α、GM-CSF和/或IL进行刺激，继续培养，得到肿瘤细胞致敏DC肿瘤疫苗；

所述抑肽酶终浓度为0.05-2.0mg/ml；亮抑蛋白酶肽终浓度为0.05-2.0mg/ml。

2.根据权利要求1所述的肿瘤细胞致敏DC肿瘤疫苗的制备方法，其特征在于：所述rhTNF-α的浓度为50-2000U/ml，所述GM-CSF的浓度为500U/ml-2000U/ml，所述IL是IL-2和/或IL-4，浓度为50U/ml-2000U/ml。

3.根据权利要求2所述的肿瘤细胞致敏DC肿瘤疫苗的制备方法，其特征在于：用浓度为50-2000U/ml的rhTNF-α刺激加入肿瘤相关全抗原的贴壁培养的DC细胞。

4.根据权利要求2所述的肿瘤细胞致敏DC肿瘤疫苗的制备方法，其特征在于：用浓度为500U/ml-2000U/ml的GM-CSF，浓度为50U/ml-2000U/ml的IL-2和浓度为500U/ml-2000U/ml的IL-4刺激加入肿瘤相关全抗原的贴壁培养的DC细胞。

5.根据权利要求1所述的肿瘤细胞致敏DC肿瘤疫苗的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：

－抗原的制备：包括

(1)取胸、腹水离心，用生理盐水洗涤，经过滤后收取单细胞悬液；

(2)用含抑肽酶和亮抑蛋白酶肽的RPMI-1640重悬步骤(1)得到的细胞；

－DC疫苗的制备：将贴壁培养的DC细胞加入步骤(2)得到的肿瘤相关全抗原细胞，加入rhTNF-α、GM-CSF和/或IL，继续培养，得到肿瘤细胞致敏DC肿瘤疫苗。