[发明专利]小麦TaSPL6基因及其应用有效
申请号: | 201510141354.2 | 申请日: | 2015-03-27 |
公开(公告)号: | CN104789574B | 公开(公告)日: | 2018-06-08 |
发明(设计)人: | 毛龙;李爱丽;王炳南;耿帅锋;冯楠 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院作物科学研究所 |
主分类号: | C12N15/29 | 分类号: | C12N15/29;C12N15/11;C12N15/10;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/46;C12Q1/6895 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 小麦 基因 分子生物学领域 基因编码区序列 编码区序列 拟南芥叶片 生物量增加 特异性引物 同源染色体 基因转化 春小麦 拟南芥 同源群 缺体 应用 克隆 发现 | ||
本发明提供了小麦TaSPL6基因及其应用,属于作物分子生物学领域。本发明设计特异性引物从中国春小麦叶的cDNA中克隆TaSPL6的编码区序列,利用缺体四体将TaSPL6定位在小麦第五同源群上,TaSPL6基因编码区序列在A、B、D同源染色体中的序列分别如SEQ ID NO.1‑3所示。本发明通过将TaSPL6基因转化拟南芥,发现该基因能够使拟南芥叶片增大、生物量增加。
技术领域
本发明涉及作物分子生物学和分子育种领域,更具体地,涉及小麦TaSPL6基因及其在染色体中的定位、以及该基因的应用。
背景技术
小麦作为一种重要的粮食作物,全世界有35%-40%的以小麦为主要粮食。同时作为三大谷物之一,产量几乎全做食用,是世界上总产量仅次于玉米的粮食作物。随着水稻、玉米等在内的多种植物全基因组测序的完成,人类开始进入功能基因的时代。利用物种已知功能的目标基因进行序列比对和分析,利用高保守序列对研究物种进行引物设计和同源序列克隆,是发现新基因的常用方法之一。
SPL(squamosa promoter binding protein-like)是一类植物特有的转录因子,在调控植物生长和生殖阶段转变、花和果实发育、光信号转导及植株形态建成等多种发育过程中发挥重要作用。SPL含有一个由80个氨基酸残基组成的高度保守的SBP结构域,以此同下游靶基因启动子区域结合,调控靶基因的表达。目前,在水稻中,对SPL基因有了比较详尽的认识。小麦作为人类重要的粮食作物,但是关于SPL基因家族在小麦中结构和功能分析还是知之甚少,对该基因在小麦的生物功能和分子基础尚不清楚。
发明内容
本发明的目的在于提供小麦TaSPL6基因及其应用。
利用水稻SPL基因保守的SBP结构域和小麦二倍体AA、DD基因草图测序结果,先在二倍体中克隆SPL基因,利用二倍体与六倍体的同源性,然后以普通小麦中国春叶片cDNA为模板利用PCR方法扩增得到在A、B、D同源染色体上的基因序列,分别如SEQ ID NO.1-3所示,该基因命名为TaSPL6。该基因定位于第五染色体同源群上。
本发明提供了小麦TaSPL6基因在小麦分子育种中的应用。
本发明提供了小麦TaSPL6基因在促进植物生长中的应用。
本发明提供了小麦TaSPL6基因在制备转基因植物中的应用。
本发明提供了小麦TaSPL6基因在小麦种质资源改良中的应用。
本发明提供了小麦TaSPL6基因在促进拟南芥生物量增加中的应用。
具体地,本发明所述的小麦TaSPL6基因位于小麦第五同源群上,其在小麦5A同源染色体的序列如SEQ ID NO.1所示,其在小麦5B同源染色体的序列如SEQ ID NO.2所示,其在小麦5D同源染色体的序列如SEQ ID NO.3所示。
本发明提供了用于克隆小麦TaSPL6基因的引物组合,其核苷酸序列如SEQ IDNO.4-5所示。
本发明提供了含有上述引物组合的试剂盒。
进一步地,本发明提供了上述试剂盒在小麦遗传育种中的应用。
进一步地,本发明提供了上述试剂盒在制备转基因植物中的应用。
相应地,本发明提供了小麦TaSPL6基因的克隆方法,利用SEQ ID NO.4-5所示的特异性引物组合,以小麦叶cDNA为模板,PCR扩增得到小麦TaSPL6基因。
进一步,本发明还提供了检测小麦TaSPL6基因的SNP分子标记,检测小麦TaSPL6A基因的SNP分子标记通过以下引物扩增得到:
SPL6A-F-primer TTGCTCTAGGGTTTCGTC
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