[发明专利]一种百尾参多糖的分离提取方法

说明书

技术领域

本发明属于天然药物技术领域，具体来说涉及一种百尾参多糖的分离提取方法。

背景技术

百尾参为百合科(Liliaceae)万寿竹属(Disporum)植物万寿竹(Disporum cantoniense(Lour.)Merr.)的根及根茎,别名又叫白味参、百尾笋、白龙须。百尾参为多年生草本植物,系苗族习用药材，其味甘、淡，性平，具有润肺止咳、健脾消积的功效，可用于虚损咳喘、痰中带血、肠风下血、食积胀满等症状。

以百尾参为主药的上市复方制剂有贵州百灵企业集团制药股份有限公司生产的咳速停糖浆及胶囊。在成分研究方面，陈磊等人采用化学分离方法，运用现代波谱技术，从百尾参乙醇提取物中得到了蒲公英赛醇（DCP-1）、木犀草素（DCP-2）、谷甾醇（DCP-4）、胡萝卜苷（DCP-5）等20个化合物，但对其主要有效成分的研究较少。

目前，尚未见对百尾参多糖进行相关研究的报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种具有抗氧化活性、止咳祛痰作用的百尾参多糖的分离提取方法。

本发明的一种百尾参多糖的分离提取方法，包括以下步骤：

（1）脱脂：将百尾参粉末与石油醚按料液比1:50在索氏提取器中，于50℃下回流脱脂3小时，得去脂百尾参粉末；

（2）提取：向去脂后的百尾参粉末中添加蒸馏水，料液比为1:20-80，于70-100℃下，提取1-4次，每次1-4小时，提取结束合并水提液；

（3）分离：水提液用布氏漏斗抽滤，滤液与95%乙醇按1:3.5-4的比例醇沉，静置6-8h；3000-4000r/min离心15-20min，去掉上清液，沉淀用蒸馏水定容到500ml；

（4）AB-8树脂脱色纯化、浓缩至原体积的1/3，得粗多糖液；

（5）脱蛋白:粗多糖液按质量比3:1的比例加入氯仿和正丁醇的混合液，混合液中氯仿与正丁醇体积比为5:1，振摇后取上层清液，加入3-5倍体积的质量浓度为95％的乙醇，于4℃下静置24小时，然后通过3000-4000r/min离心15-20min得脱蛋白百尾参多糖；

（6）洗涤，冷冻干燥即得。

上述的一种百尾参多糖的分离提取方法，其中：百尾参粉末是将新鲜百尾参洗净，干燥后粉碎所得。

上述的一种百尾参多糖的分离提取方法，其中：步骤（3）中所述百尾参粉末和蒸馏水的优选料液比为1:40-60。

上述的一种百尾参多糖的分离提取方法，其中：步骤（3）中所述提取温度优选为80℃-100℃。

上述的一种百尾参多糖的分离提取方法，其中：步骤（3）中所述提取时间优选为2-4小时。

上述的一种百尾参多糖的分离提取方法，其中：步骤（3）中所述提取次数优选为2-4次。

上述的一种百尾参多糖的分离提取方法，其中：步骤（7）中依次采用乙醇、丙酮洗涤。

本发明与现有技术相比，具有明显有益效果，从以上技术方案可知：本发明的分离提取方法，可获得纯度高、品质好的百尾参多糖，通过对小鼠酚红祛痰作用及对小鼠氨水引咳试验研究，证明该百尾参多糖具有较强止咳祛痰作用，同时其还具有明显的抗氧化活性，该抗氧化活性包括·OH清除率、DPPH·清除率、Fe²⁺螯合能力、抗氧化能力及还原能力。且方法简单、易操作，因而极具市场推广价值。

附图说明

图1是百尾参多糖对·OH清除率；

图2是百尾参多糖对DPPH·清除率；

图3是百尾参多糖对Fe²⁺螯合能力；

图4是百尾参多糖的抗氧化能力；

图5是百尾参多糖的还原能力。

具体实施方式

下面通过药效试验例来进一步说明本发明的有益效果。

以实施例5得到的产品进行百尾参多糖药效实验研究：

1、百尾参多糖的抗氧化活性

1.1.清除·OH活性