[发明专利]一种成纤维细胞生长因子抑制多肽及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及成纤维细胞生长因子抑制多肽及其应用，具体涉及具有抑制成纤维细胞生长因子，治疗恶性肿瘤的多肽。

背景技术

血管生成是恶性实体肿瘤突破上皮基底膜后进一步生长所必须的。肿瘤中新形成的血管具有其自身独特的结构特点，表现为管壁不完整，无平滑肌成分，仅由有孔的内皮细胞和片状的基膜构成。多数学者认为，新生血管的结构特点使恶性肿瘤组织发生远处转移成为可能。因此，恶性实体肿瘤中新生血管的定量被认为是一种重要的独立的预后标志。

成纤维细胞生长因子，对肿瘤细胞有明显的趋向活性，刺激成纤维细胞，血管内皮细胞等向病灶部位移动。当细胞迁移至病灶部位时，开始进入增殖和修复期，其中最关键的步骤之一是肉芽组织的形成，肉芽组织的本质是大量的毛细血管和丰富的成纤维细胞，是成纤维细胞、血管内皮细胞及血管平滑肌细胞的高效促生长剂，能够强烈促进新生毛细血管的形成，显著增加肉芽组织毛细血管数量和血液流量，为肿瘤组织提供所需要的氧及丰富的营养物质，促进肿瘤的生长。抑制成纤维细胞生长因子，可以有效抑制肿瘤组织中血管的新生，断绝肿瘤组织生长需要的氧及营养物质，将肿瘤细胞“饿死”。从而，达到治疗肿瘤的效果。

目前，没有成熟开发的成纤维细胞生长因子抑制多肽问世，用于治疗恶性肿瘤。

本专利中的成纤维细胞生长因子抑制多肽已证明在结肠癌病中有效，具有在其他肿瘤模型中开发的前景。

发明内容

发明目的

本发明提供全新的序列，该序列为成纤维细胞生长因子拮抗剂，对恶性肿瘤具有很好的疗效。

技术方案

成纤维细胞生长因子抑制多肽，其特征在于其序列为GMLGGQEMWSWKCLLFWLKRRNFWQG。

所述的成纤维细胞生长因子抑制多肽在制备治疗肿瘤药物中的应用。

所述的成纤维细胞生长因子抑制多肽在制备治疗肝癌药物中的应用。

一种检测肿瘤的试剂盒，其含有权利要求1所述的成纤维细胞生长因子抑制多肽。

所述的试剂盒，其特征在于还有

(1)包被液：pH9.6的0.05mol/L碳酸盐缓冲液；

(2)PBS缓冲液：pH7.4的0.02mol/L磷酸盐缓冲液；

(3)抗体稀释液：pH7.4的0.02mol/LPBS和0.2％BSA；

(4)封闭液：pH9.6的0.05mol/L碳酸盐缓冲液和2.0％BSA

(5)洗涤液：0.02mol/LPBS(pH7.4)和0.05％Tween-20；

(6)底物液：可溶性单组份TMB底物溶液；

(7)终止液：2mol/L硫酸溶液；

(8)成纤维细胞生长因子抗体；

(9)山羊抗小鼠IgG。

有益效果

利用固相合成法化学合成成纤维细胞生长因子抑制多肽，该多肽具有全新的序列，该多肽可体外抑制成纤维细胞生长因子，治疗恶性肿瘤，如结肠癌。我们发现的成纤维细胞生长因子抑制多肽可以同时抑制结肠癌细胞增殖活力，并在体内试验中提高荷瘤小鼠生存率，具有潜在的新药开发价值。

具体实施方式

成纤维细胞生长因子抑制多肽由吉尔生化(上海)有限公司合成。

实施例1

成纤维细胞生长因子抑制多肽对体外培养人结肠癌细胞的生长和存活IC50。

采用MTT比色法。将对数生长的人结肠癌细胞，以1.0×105加入96孔培养板中，培养24h，实验孔、阳性药物对照孔分别加入不同浓度的实验药物成纤维细胞生长因子抑制多肽(上海生工合成)和阳性对照药物紫杉醇；空白组加入相同体积的溶剂。每孔设五个复孔，培养48h，分别在0h、2h、8h、14h、20h、24h、36h、，48h每孔加入MTT，作用4h后，加入DMSO，孵育30min，在酶标仪620nm处测定吸光度A值，按公式人结肠癌细胞生长抑制率＝(1-实验组吸光值/对照组吸光值)×100％。计算出实验药物的IC50为5.8μM，阳性对照药的IC50为4.2μM。

实施例2

成纤维细胞生长因子抑制多肽对体外培养人肝癌细胞的生长和存活IC50。