[发明专利]一种细胞培养方法有效
申请号: | 201510149760.3 | 申请日: | 2015-03-31 |
公开(公告)号: | CN104694474B | 公开(公告)日: | 2017-09-05 |
发明(设计)人: | 张永新;叶治家;王珍应;王珍祥;徐张展;王瑛;夏静;莫妮卡·张;朱融晖;谭玉麟;戴青 | 申请(专利权)人: | 南京新诺丹生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N5/0789 | 分类号: | C12N5/0789;C12N5/02 |
代理公司: | 南京知识律师事务所32207 | 代理人: | 卢亚丽 |
地址: | 210000 江苏省南京*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 细胞培养 方法 | ||
1.一种细胞培养的方法,其特征在于
A.在同一个培养容器进行的细胞培养至少包括静态培养的过程、载体运动的过程、培养容器两端对调的过程和细胞分布的过程;
B.培养容器中具有载体;
C.静态培养的过程中,载体分布于培养容器的一端,细胞分布在载体的表面、载体之间的空隙或培养容器内的任何部分中,与培养容器保持相对静止;
D.载体运动的过程中,载体由培养容器的一端向另一端运动;
E.培养容器对调的过程中,载体固定在培养容器的一端,并随培养容器的两端位置变化发生对调;
F.细胞分布的过程中,载体重新位于培养容器的一端,细胞由混悬状态分布在载体的表面、载体之间的空隙或培养容器内的任何部分中;
其中,所述的细胞培养过程中所用的各载体质量、体积或密度不均一;载体的直径大于1mm;载体的密度不超过8g/cm3;载体密度比培养基密度±0.02‐0.4g/cm3;载体由培养容器的一端向另一端运动,运动的速率不高于1m/s;静态培养之间的动态培养由载体运动和培养容器两端对调循环重复进行4‐20次来实现;培养容器的两端完成1次对调的时间T(s)与磁场强度B(mT)之间符合公式T≥105·B‐3;培养容器的两端完成1次对调的时间T不低于0.5s;将载体固定在培养容器一端的磁场强度不低于26mT。
2.根据权利要求1所述的细胞培养方法,其特征在于所述的载体可磁化,在磁场下具备磁性,在远离磁场下磁性快速消失;培养容器对调的过程中,载体在磁场的作用下固定在培养容器的一端。
3.根据权利要求1所述的细胞培养方法,其特征在于培养容器的对调采用围绕轴翻转的方式。
4.根据权利要求1所述的细胞培养方法,其特征在于培养过程中的静态培养时,载体位于培养容器的底端,培养容器为可旋转和/或翻转的结构,当培养容器的任意侧壁位于下方时,该侧壁为培养器的底端。
5.根据权利要求4所述的细胞培养方法,其特征在于细胞生长所位于的培养容器的底部由培养容器的不同侧壁在培养过程中交替构成。
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