[发明专利]一种快速有效的提取发育早期棉籽中油脂的方法

权利要求书

1.一种快速有效的提取发育早期棉籽中油脂的方法，其特征在于：所述的有效快速提取方法包括以下步骤：

①在棉花开花时进行挂牌标记，并标明开花日期，选择开花期发育一致的植株；

②分别收集花后5天与10天的棉籽样品，并用镊子将棉籽从棉桃中取出，轻轻剥离棉籽外壳，取出棉仁收集于50ml离心管中，液氮速冻后，至-80℃超低温冰箱中保存；

③使用液氮碾磨棉仁样品，称取10μg棉仁粉末，装入进口可密闭1.5ml离心管中；

④加入体积比为2∶1的氯仿-甲醇的混合试剂0.6ml，在40℃、200r/min摇床上处理4h后，6000r/min离心10min，然后吸取油脂相层于离心管中；

⑤在低温旋转真空干燥仪上蒸干至恒重，减去离心管中重，计算油脂获得率，从而避免高温及长时间的常规旋转蒸发方法造成油脂中多不饱和脂肪酸组分的氧化。

2.如权利要求1所述的快速有效的提取发育早期棉籽中油脂的方法，其特征在于：通过在甲酯化的油脂中增添内标正二十四碳烷的方法，进而对各脂肪酸组分的进行定量分析， 包括以下步骤：

①在所提取到油脂的离心管中，加入0.2ml 1mol/l KOH-甲醇溶液，60℃水浴皂化30min后，再加入0.4ml 1mol/l盐酸-甲醇溶液，60℃水浴甲酯化30min，取出至室温；

②在己甲酯化油脂的离心管中加入含内标正二十四碳烷的正己烷试剂0.2ml，其中每0.2ml正己烷中加入0.1μg正二十四碳烷，充分振摇，静置，吸取上层正己烷甲酯相至1ml小离心管，用少量无水Na₂SO₄脱水后，用气相色谱测定样品中主要脂肪酸组分的相对含量，结合内标的量，进而对各脂肪酸组分的进行定量分析。