[发明专利]用于鉴定草原血蜱的靶序列、引物、鉴定方法及试剂盒有效

专利信息
申请号: 201510155871.5 申请日: 2015-04-02
公开(公告)号: CN105463068B 公开(公告)日: 2019-07-23
发明(设计)人: 林祥梅;吕继洲;张舟;吴绍强;王慧煜;王彩霞 申请(专利权)人: 中国检验检疫科学研究院
主分类号: C12Q1/6888 分类号: C12Q1/6888;C12N15/11
代理公司: 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 代理人: 王文君
地址: 100123 *** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 用于 鉴定 草原 序列 引物 方法 试剂盒
【权利要求书】:

1.一种用于鉴定草原血蜱(Haemaphysalis verticalis)的靶序列,其特征在于,所述靶序列的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,所述靶序列可通过核苷酸序列如SEQ ID NO.2、3所示的特异性引物对PCR扩增获得。

2.权利要求1所示的靶序列在非疾病诊断目的的鉴定草原血蜱中的应用。

3.用于扩增权利要求1所示靶序列的特异性引物对,其核苷酸序列如SEQ ID NO.2、3所示。

4.权利要求3所述的特异性引物对在制备鉴定草原血蜱(Haemaphysalis verticalis)试剂盒中的应用。

5.非疾病诊断目的的鉴定草原血蜱(Haemaphysalis verticalis)的方法,其特征在于,以待测昆虫样品总DNA为模板,以权利要求1所述的靶序列为目标,利用权利要求3所述的特异性引物对进行PCR,根据扩增条带的大小判定结果。

6.如权利要求5所述的方法,其特征在于,若扩增条带为477bp,则待测昆虫样本为草原血蜱。

7.如权利要求5所述的方法,其特征在于,50μl PCR反应体系为:10×PCR buffer 5μl、10mM上、下游引物各2μl、10mM dNTPs2μl、50U的Taq酶1μl,10~20ng DNA模板2μl,加灭菌双蒸水至50μl;

PCR反应程序:预热94℃,5min;94℃30s,50℃30s,72℃30s,共36个循环;延伸72℃,7min,4℃保存。

8.一种用于鉴定草原血蜱(Haemaphysalis verticalis)的试剂盒,其特征在于,含有一对引物,其核苷酸序列如SEQ ID NO.2、3所示。

9.权利要求8所述的试剂盒在非疾病诊断目的的鉴定草原血蜱(Haemaphysalisverticalis)中的用途。

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