[发明专利]一种脐血单个核细胞冻存液、应用、制备方法在审
| 申请号： | 201510159307.0 | 申请日： | 2015-04-03 |
| 公开（公告）号： | CN104705291A | 公开（公告）日： | 2015-06-17 |
| 发明（设计）人： | 葛啸虎;陈海佳;王一飞;戴国胜;罗二梅 | 申请（专利权）人： | 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司 |
| 主分类号： | A01N1/02 | 分类号： | A01N1/02 |
| 代理公司： | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人： | 赵青朵 |
| 地址： | 510000 广东省广州市国*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 单个 细胞 冻存液 应用 制备 方法 | ||
1.一种脐血单个核细胞冻存液，其特征在于，包括如下组分：
DMSO 5～20体积份
羟乙基淀粉 5～60体积份
勃脉力A 20～90体积份。
2.根据权利要求1所述的脐血单个核细胞冻存液，其特征在于，包括如下组分：
DMSO 10体积份
羟乙基淀粉 30体积份
勃脉力A 60体积份。
3.根据权利要求1所述的脐血单个核细胞冻存液，其特征在于，包括如下组分：
DMSO 5～20v/v％
羟乙基淀粉 5～60v/v％
勃脉力A 20～90v/v％
各组分的体积百分数之和为100％。
4.根据权利要求1所述的脐血单个核细胞冻存液，其特征在于，包括如下组分：
DMSO 10v/v％
羟乙基淀粉 30v/v％
勃脉力A 60v/v％。
5.根据权利要求1至4任一项所述的脐血单个核细胞冻存液在冻存脐血单个核细胞中的应用。
6.一种脐血单个核细胞的冻存方法，其特征在于，用如权利要求1至4任一项所述的脐血单个核细胞冻存液冻存所述脐血单个核细胞。
7.根据权利要求6所述的冻存方法，其特征在于，包括如下步骤：
步骤1：获得脐血单个核细胞；
步骤2：重悬所述脐血单个核细胞，获得脐血单个核细胞悬液；
步骤3：取所述脐血单个核细胞悬液与如权利要求1至4任一项所述的脐血单个核细胞冻存液混合，分装，冻存。
8.根据权利要求7所述的冻存方法，其特征在于，所述脐血单个核细胞悬液与如权利要求1至4任一项所述的脐血单个核细胞冻存液的体积比为5:1～1:5。
9.根据权利要求7或8所述的冻存方法，其特征在于，步骤1所述获得脐血单个核细胞具体为获得添加枸橼酸钠抗凝剂的脐血，用RPMI1640培养基1:1稀释后，添加到淋巴细胞分离液Ficoll上，700g离心30min，吸取脐血单个核细胞层，用RPMI1640培养基洗涤2遍，250g离心5min，获得脐血单个核细胞。
10.根据权利要求7至9任一项所述的冻存方法，其特征在于，步骤2重悬所述脐血单个核细胞具体为用勃脉力A重悬CBMC。
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