[发明专利]烟草原生质体的高效分离、转化和再生体系在审
申请号: | 201510159339.0 | 申请日: | 2015-04-03 |
公开(公告)号: | CN104789518A | 公开(公告)日: | 2015-07-22 |
发明(设计)人: | 高崑;张康 | 申请(专利权)人: | 北京吉诺沃生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/04 | 分类号: | C12N5/04;C12N15/82;A01H4/00 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王文君 |
地址: | 102206 北京市昌平区科*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 烟草 原生 质体 高效 分离 转化 再生 体系 | ||
1.一种用于烟草原生质体的高效分离、转化和再生过程中的试剂组合,其特征在于,包括1/2MS培养基、A培养基、B培养基、C培养基、MS培养基、MS再生培养基、W5洗液、转化液、含有聚乙二醇的溶液、酶解液、W5洗液和C:B培养基;
所述1/2MS培养基、A培养基、B培养基、C培养基、MS培养基和MS再生培养基的物质组成包括如下试剂:
其中所述MS微量100×的物质组成如下:
所述铁盐1000×的物质组成如下:
所述W5洗液的组成包括氯化钠8.9g/L、氯化钙18.4g/L、氯化钾0.37g/L,葡萄糖0.9g/L;
所述转化液的组成包括甘露醇91g/L,氯化镁14.25g/L,乙磺酸1g/L;
所述含有聚乙二醇溶液的组成包括聚乙二醇400g/L,甘露醇72.9g/L,硝酸钙16.4g/L。
2.根据权利要求1所述的试剂组合,其特征在于,所述酶解液的组成包括在所述C培养基中添加终浓度为120g/L的纤维素酶R10和60g/L的离析酶R10。
3.根据权利要求1或2所述的试剂组合,其特征在于,所述Evans Blue染液的组成包括在所述W5培养基中添加2.5g/L的Evans Blue粉末。
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