[发明专利]烟草原生质体的高效分离、转化和再生体系在审

专利信息
申请号: 201510159339.0 申请日: 2015-04-03
公开(公告)号: CN104789518A 公开(公告)日: 2015-07-22
发明(设计)人: 高崑;张康 申请(专利权)人: 北京吉诺沃生物科技有限公司
主分类号: C12N5/04 分类号: C12N5/04;C12N15/82;A01H4/00
代理公司: 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 代理人: 王文君
地址: 102206 北京市昌平区科*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 烟草 原生 质体 高效 分离 转化 再生 体系
【权利要求书】:

1.一种用于烟草原生质体的高效分离、转化和再生过程中的试剂组合,其特征在于,包括1/2MS培养基、A培养基、B培养基、C培养基、MS培养基、MS再生培养基、W5洗液、转化液、含有聚乙二醇的溶液、酶解液、W5洗液和C:B培养基;

所述1/2MS培养基、A培养基、B培养基、C培养基、MS培养基和MS再生培养基的物质组成包括如下试剂:

其中所述MS微量100×的物质组成如下:

成份终浓度mg/LCoCl2·6H2O2.5KI83MnSO4·H2O1690H3BO3620CuSO4·5H2O2.5

Na2MoO4·2H2O25ZnSO4·7H2O860

所述铁盐1000×的物质组成如下:

成份终浓度mg/LFeNaEDTA36700

所述W5洗液的组成包括氯化钠8.9g/L、氯化钙18.4g/L、氯化钾0.37g/L,葡萄糖0.9g/L;

所述转化液的组成包括甘露醇91g/L,氯化镁14.25g/L,乙磺酸1g/L;

所述含有聚乙二醇溶液的组成包括聚乙二醇400g/L,甘露醇72.9g/L,硝酸钙16.4g/L。

2.根据权利要求1所述的试剂组合,其特征在于,所述酶解液的组成包括在所述C培养基中添加终浓度为120g/L的纤维素酶R10和60g/L的离析酶R10。

3.根据权利要求1或2所述的试剂组合,其特征在于,所述Evans Blue染液的组成包括在所述W5培养基中添加2.5g/L的Evans Blue粉末。

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