[发明专利]一种急进高原实地大鼠缺氧模型的构建方法

说明书

技术领域

本发明涉及医学动物模型研究领域，尤其涉及一种急进高原实地大鼠缺氧模型的构建方法。

背景技术

中国高原地域辽阔，每年因工作、旅游从内地前往高原地区的人数超过1000万人/次，而高原恶劣自然环境，严重影响到进入高原人群的身体健康。据统计平原人快速进入到海拔2500m以上地区，60~90%的人会发生急性高原病，从而制约了高原地区国民经济的发展。

急性高原病，即机体快速进入到高原地区（医学上的高原指在海拔2500m以上的地区，青海标准）或久居高原进入到更高海拔地区，在数小时内发病，出现头痛、头晕、心悸、胸闷、气促、乏力、睡眠障碍，重者出现恶心、呕吐、紫绀、少尿或血尿等症状。一般无特殊重要体征，常见有呼吸加深加快，心率加快，面色苍白，肢端发凉，少数患者血压轻度异常、颜面或/和四肢水肿，经过在高原短期适应或对症治疗，症状及体征显著减轻或消失，机体可迅速恢复正常（高钰琪主编，高原军事医学，重庆出版社（2005）250-276）。

目前，急性高原反应的发病机理尚不清楚，这也是制约高原反应合理用药及相关药物研发的重要原因。当机体快速暴露在低压缺氧环境中时，机体会出现一系列生理生化反应，如血气、生化指标及组织器官结构和功能发生变化。因此，亟需建立一种符合高原缺氧症状的模型，以便分析机体进入低压缺氧环境后发展成为急性高原症状的病理生理情况，从而有利于合理探究急性高原疾病的发病机理，并为实地缺氧实验的进行和抗缺氧药物的研发提供条件。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种简单易行、模型制作成功率高、能真实反应动物缺氧损伤情况的急进高原实地大鼠缺氧模型的构建方法。

为解决上述问题，本发明所述的一种急进高原实地大鼠缺氧模型的构建方法，包括以下步骤：

⑴在高原低压低氧模拟舱中模拟海拔3500米，通过对实验大鼠进行跑台实验，筛选出缺氧敏感型大鼠；

⑵随机选取所述缺氧敏感型大鼠，并采用急进高原方式放入高原实验场；

⑶建立急进高原实地大鼠缺氧条件；

⑷在缺氧24~120h后鉴定所述缺氧敏感型大鼠的血气生化指标和病理指标。

所述步骤⑴中的实验大鼠是指SPF级健康Wistar和/或SD雄性大鼠，体重180~300g，6~7周龄。

所述步骤⑴中的筛选方法是指在高原低压低氧模拟舱中模拟海拔3500米，将15~100只实验大鼠在速度10~20m/min、坡度5~20℃的条件下进行跑台实验，以实验大鼠在跑台上的运动时间作为耐力评价标准，运动时间偏长的5~40只实验大鼠作为耐受大鼠，运动时间处于中间段的5~20只实验大鼠作为不敏感型大鼠，运动时间偏短的5~40只实验大鼠作为敏感型大鼠。

所述耐力评价标准的运动时间为30~540min。

所述步骤⑵中的急进高原方式是指所述缺氧敏感型大鼠经上海虹桥机场航空运输急进至兰州中川机场后，立即改用恒温箱式货车转运至青海省玛多县花石峡镇，并于12小时内完成急进过程。

所述步骤⑶中急进高原实地大鼠缺氧条件是指实地海拔 2500~4300m，大气压60.2~75.3KPa，温度18~22℃，相对湿度28~55%，所述缺氧敏感型大鼠食用标准饲料，自由饮用纯净水，实验时间为24~120h。

本发明与现有技术相比具有以下优点：

1、本发明通过急进海拔4300m高原缺氧环境，建立了实验大鼠缺氧大鼠模型，有效地反映了实验大鼠缺氧的真实情况，通过鉴定发现急进海拔4300m实地大鼠血氧饱和度降低，动脉血氧分压降低，动脉血乳酸升高，心、肝、脑、肾及肺出现不同程度的病理性损伤，形成高原缺氧损伤的生理病理状态。

⑴所需材料

① 实验动物

实验所用大鼠为SPF级健康雄性Wistar大鼠，合格证编号为2007000525382，6~7周龄，体重为180~220g。

② 实验仪器

海王星500E手持式GPS仪（上海达赛导航设备有限公司），PHOX-plus-L便携式动物电解质与血气分析仪（美国Nova Biomedical有限公司），BX-3010全自动生化分析仪（日本Sysmex医用电子有限公司），YDS-30-80液氮罐（乐山东亚机电工贸有限公司）ASP-200S自动脱水机、M 398419自动切片机、EG 1150H自动包埋机（德国莱卡有限公司），BX51光学显微镜（日本Olympus有限公司），ZH-PT型计算机控制动物实验跑台（安徽正华生物仪器设备有限公司）。

③ 实验试剂