[发明专利]一种腐败检材降解DNA的检测方法及其应用

权利要求书

1.一种核小体核心区域遗传标记的检测方法在腐败检材降解DNA法医检测中的应用；其特征在于，遗传标记的检测方法包括以下步骤：a）获取人体血液组织中位于核小体核心区域DNA；b）对所述核小体核心区域DNA进行测序；c）将测序得到的序列与人类基因组序列信息进行比对，筛选，获得了核小体核心区域STRs遗传标记；d）根据所述STRs遗传标记的序列设计上、下游引物；e）提取腐败检材的DNA；f）用设计的上、下游引物对所述腐败检材的DNA进行PCR扩增，得扩增产物；g）对所述扩增产物电泳，根据扩增获得的每个基因座进行分析；

所述STRs遗传标记为D10S1248、D18S51、TH01、TPOX或DYS391中的任意一个；

所述D10S1248遗传标记的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，扩增所述D10S1248遗传标记的上游引物的核苷酸序列为SEQ ID NO:11、下游引物的核苷酸序列为SEQ ID NO:12；

所述D18S51遗传标记的核苷酸序列为SEQ ID NO:2，扩增所述D18S51遗传标记的上游引物的核苷酸序列为SEQ ID NO:13、下游引物的核苷酸序列为SEQ ID NO:14；

所述TH01遗传标记的核苷酸序列为SEQ ID NO:3，扩增所述TH01遗传标记的上游引物的核苷酸序列为SEQ ID NO:15、下游引物的核苷酸序列为SEQ ID NO:16；

所述TPOX遗传标记的核苷酸序列为SEQ ID NO:4，扩增所述TPOX遗传标记的上游引物的核苷酸序列为SEQ ID NO:17、下游引物的核苷酸序列为SEQ ID NO:18；

所述DYS391遗传标记的核苷酸序列为SEQ ID NO:5，扩增所述DYS391遗传标记的上游引物的核苷酸序列为SEQ ID NO:19、下游引物的核苷酸序列为SEQ ID NO:20。

2.根据权利要求1所述的核小体核心区域遗传标记的检测方法在腐败检材降解DNA法医检测中的应用，其特征在于，将所述测序获得的序列与人类基因组序列信息进行比对时，每条测序获得的序列与人类基因组序列比对不多于3个碱基错配的为有效序列，可用于进一步筛选。

3.根据权利要求1所述的核小体核心区域遗传标记的检测方法在腐败检材降解DNA法医检测中的应用，其特征在于，所述STRs遗传标记通过编程筛选，其编程条件为：①允许有0个碱基错配；②STR重复单位的基序长度为3、4或者5bp；③STR重复单位的重复次数大于5；④对于重复单元相同的所有潜在STR，取出其两翼序列，两翼序列有任意一端长度小于10bp的过滤掉；⑤对两翼序列分别两两比较，潜在STR向左、右分别取10bp，完全相同的认定为同一个STR；⑥一个STR有3个及以上的序列支持，认定该STR遗传标记为真实存在；全部满足以上6个条件的序列为有效STRs遗传标记。