[发明专利]一种球毛壳菌生物菌肥粉剂的制备方法及应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种球毛壳菌生物菌肥粉剂的制备方法及应用，尤其涉及以球毛壳菌(Chaetomium globosum)ND35菌株的子囊孢子为活性成分的生物肥料粉剂的制备方法，属于农业微生物领域。

背景技术

球毛壳菌(Chaetomium globosum)ND35菌株是一株分离自健康毛白杨的植物内生真菌，属于子囊菌门、核菌纲、球壳目、黑孢壳科、毛壳菌属。

球毛壳菌ND35菌株的抑菌谱很广，对黄瓜枯萎病菌、苦瓜枯萎病菌、西瓜枯萎病菌、黄瓜霜霉病菌、苹果轮纹病菌、苹果树腐烂病菌、杨树烂皮病菌和水泡溃疡病菌以及立枯丝核菌的菌丝生长都有明显的拮抗作用，代谢过程中能够产生具有抑菌活性的抗生物质，并能抑制黄瓜枯萎病菌、苦瓜枯萎病菌、苹果轮纹病菌和杨树水泡溃疡病菌等的孢子萌发。在透射电镜下观察，发现球毛壳ND35与立枯丝核菌接触并发生重寄生作用后，球毛壳ND35菌丝寄生到病原菌菌丝内部后，在互作过程中产生了几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶，会使其细胞结构发生紊乱、细胞壁降解。

已有的试验结果表明，球毛壳菌ND35菌株能有效定殖于蔬菜植物如苦瓜、黄瓜、番茄、菜豆和经济林木如杨树、核桃、板栗以及大田作物如甘薯、小麦、马铃薯、烟草、生姜的植株中，并对黄瓜、苦瓜、茄子和番茄的生长有明显的促进作用；盆栽条件下接种球毛壳菌ND35菌株后，可有效地防治黄瓜苗期猝倒病的发生，也能诱导番茄和菜豆对灰霉病菌产生系统抗病性；还可有效防治菜豆立枯病。大田条件下对杨树的侧根和胸径生长具有一定的促进作用并诱导其对腐烂病菌和叶锈病菌产生抗性。球毛壳菌ND35菌株对板栗侧根和毛细根的生长具有积极影响，可增加板栗花序的数量、侧根和毛细根数量，在后期对地茎生长和一级分枝数也产生明显促生作用；对杨树扦插苗、菜豆、黄瓜、烟草、生姜的生长表现出促生作用。通过扫描电镜观察球毛壳菌ND35菌株对杨树组培苗的侵染定殖发现：子囊孢子萌发后，产生的菌丝多集中于根毛，但并不侵染根毛，主要通过根、茎部表面细胞间的缝隙侵入，或在根表面形成附着胞或菌丝足，通过形成侵染钉直接从表皮细胞侵入，在叶部主要从气孔侵入叶片内部，侵入根部的菌丝主要定殖于表皮细胞、外皮层细胞和细胞间隙，未进入内皮层和维管束组织。

球毛壳菌ND35菌株抗生物质粗提物对黄瓜、菜豆和小麦种子的萌发没有抑制作用，能够显著增加须根数、根鲜重和促进苗期生长，球毛壳菌ND35菌株活体菌剂的施用并不会减少黄瓜、番茄和菜豆根际土壤的细菌总量，而对黄瓜根际土壤的有益菌数量积累有一定的促进作用。球毛壳菌ND35菌株的子囊孢子在河水、水库水、自来水中均不能萌发且能自行消解，当浓度不大于10⁵cfu/ml时，不会对鱼类的生长造成影响；球毛壳菌ND35菌株的子囊孢子对小白鼠急性经口毒性属于“低毒”级，急性经皮肤单次刺激试验和经兔眼单次刺激试验结果均表明为“无刺激性”；可推断，球毛壳菌ND35菌株作为活体微生物制剂，与其它微生物制剂一样无毒、无污染、无残毒，对土壤中其它有益微生物无不良影响，不影响土壤和环境中微生态循环，用于设施蔬菜及陆地等作物土传病害的生物防治和增产促生无明显性风险。

球毛壳菌ND35菌株的环境适应性非常强，能够适应恶劣的盐碱条件。在室内，以PDA为基础培养基，研究酸碱度和盐分浓度对球毛壳菌ND35的菌丝生长和孢子萌发的影响，结果发现：在pH值3-12范围内，球毛壳菌ND35的菌丝能够正常生长，在含1％-10％的Ca²⁺、K⁺、N和P的培养基中，球毛壳菌ND35的菌丝依旧能够正常生长，且生长速率未受到酸碱度和盐分的影响；球毛壳菌ND35的子囊孢子在pH值为3-12范围内的PDB培养液中，孢子的萌发也未受到影响。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种制备生物菌肥的方法。

本发明提供的制备生物菌肥的方法包括如下步骤：将球毛壳菌(Chaetomium globosum)ND35 CGMCC No.4136的孢子、腐植酸和壳聚糖混匀，得到生物菌肥。

上述方法中，所述球毛壳菌(Chaetomium globosum)ND35 CGMCC No.4136的孢子、所述腐植酸和所述壳聚糖的配比为2×10¹¹cfu：(245-275)g：(35-45)g。

上述方法中，所述球毛壳菌(Chaetomium globosum)ND35 CGMCC No.4136的孢子为小于100目的孢子粉。