[发明专利]一种蔗渣固定化组合菌及其在土壤多环芳烃菲污染修复中的应用

权利要求书

1.一种蔗渣固定化组合菌，其特征在于采用蔗渣为载体固定化真菌和细菌的组合，其中所述的真菌为哈茨木霉菌属，所述的细菌为克雷伯氏菌属。

2.根据权利要求1所述的一种蔗渣固定化组合菌，其特征在于所述的哈茨木霉菌属真菌与克雷伯氏菌属细菌由石油化工厂附近的土壤经富集培养、分离纯化得到。

3.根据权利要求2所述的一种蔗渣固定化组合菌，其特征在于所述的真菌和细菌在接种于蔗渣载体时预先分别经过培养制备成真菌菌悬液和细菌菌悬液。

4.根据权利要求3所述的一种蔗渣固定化组合菌，其特征在于将所述的真菌菌悬液和细菌菌悬液分别接种于无机盐液体培养液处理过的蔗渣载体上于30℃，转速150rpm的摇床内振荡培养至生物量最大而制得固定化组合菌。

5.根据权利要求4所述的一种蔗渣固定化组合菌，其特征在于所述的真菌菌悬液和细菌菌悬液与处理过的蔗渣的用量比为1：1：2～6(ml/ml/g)，优选真菌菌悬液和细菌菌悬液与处理过的蔗渣的用量比为1：1：3(ml/ml/g)。

6.根据权利要求3所述的一种蔗渣固定化组合菌，其特征在于所述真菌菌悬液和细菌菌悬液通过以下步骤培养制备而得：

将纯化后的真菌和细菌分别接种于50mL液体培养基中，并将pH调至7.0，于30℃，150r/min的摇床上振荡培养48h至微生物的生物量达到最大，分别取4mL的菌液于离心管内，于4000r/min下离心10min，然后将离心管内上清液倒出，补充磷酸缓冲液继续离心10min，如此重复3次，制成菌悬液置于4℃冰箱备用。

7.根据权利要求5所述的一种蔗渣固定化组合菌，其特征在于制备固定化组合菌的步骤为：

称取蔗渣载体，洗净烘干剪碎后加入锥形瓶中，灭菌处理后加入无菌的无机盐液体培养液，再分别加入真菌菌悬液和细菌菌悬液，混匀密封后于30℃，转速为150rpm的摇床内振荡培养2天至微生物生物量最大即得蔗渣固定化组合菌，其中所述的无机盐液体培养液与蔗渣载体的用量比为10：3(mL/g)。

8.一种权利要求1-7中任一项所述的蔗渣固定化组合菌在土壤多环芳烃菲污染修复中的应用。

9.根据权利要求8所述的一种蔗渣固定化组合菌在土壤多环芳烃菲污染修复中的应用，其特征在于所述蔗渣固定化组合菌用量为以蔗渣载体1重量份处理其10倍重量内的污染土壤。