[发明专利]一种微生物絮凝剂的生产方法在审
申请号: | 201510166492.6 | 申请日: | 2015-04-09 |
公开(公告)号: | CN104726518A | 公开(公告)日: | 2015-06-24 |
发明(设计)人: | 李琳;马放;李昂;赵丹;魏薇;王爽 | 申请(专利权)人: | 哈尔滨工业大学 |
主分类号: | C12P19/04 | 分类号: | C12P19/04;C02F1/56;C12R1/01 |
代理公司: | 哈尔滨市松花江专利商标事务所 23109 | 代理人: | 侯静 |
地址: | 150001 黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 微生物 絮凝 生产 方法 | ||
1.一种微生物絮凝剂的生产方法,其特征在于该方法按以下步骤进行:
一、挑取不动杆菌接种到富培养基中,于28℃~35℃、140~160r/min、pH6.5~7.5的条件下培养18h~24h,得到活化的菌液,将活化的菌液按照5%的接种量,接入产絮培养基中;
二、按照以下条件进行发酵培养:初始pH为6~8,培养温度为15℃~30℃,摇床转速为120r/min~150r/min,培养时间为20h~30h,得发酵液;
三、将发酵液于3000r/min离心10min,收集菌体沉淀,PBS洗2~3遍,然后加入细菌裂解液,再于冰浴条件进行超声波破碎20min,所得溶液于8000r/min离心5min,收集上清,加入CTAB,混匀后形成沉淀,静置离心,收集沉淀物,用无水乙醇和丙酮分别清洗沉淀2~3次,此沉淀即为微生物絮凝剂;将微生物絮凝剂冷冻干燥保存。
2.根据权利要求1所述的一种微生物絮凝剂的生产方法,其特征在于步骤一所述富集培养基由0.2g/L MgSO4·7H2O、5g/L葡萄糖、3.8g/L牛肉膏、10g/L蛋白胨、16g/L琼脂和蒸馏水组成,pH为7.2。
3.根据权利要求1或2所述的一种微生物絮凝剂的生产方法,其特征在于步骤一所发酵培养基由14~18g/L葡萄糖、8~12g/L蔗糖、0.5~0.8g/L酵母膏、0.08~0.15g/L尿素、0.4~0.6g/L硫酸铵、0.8~1.2g/L KH2PO4、2~3g/L K2HPO4、0.2~0.4g/L MgSO4、0.1~0.3g/L NaCl和蒸馏水组成。
4.根据权利要求3所述的一种微生物絮凝剂的生产方法,其特征在于步骤一中于33℃、150r/min、pH 7.2的条件下培养24h。
5.根据权利要求4所述的一种微生物絮凝剂的生产方法,其特征在于步骤三中细菌裂解液的体积为发酵液体积的10%。
6.根据权利要求5所述的一种微生物絮凝剂的生产方法,其特征在于步骤三中上清中CTAB的质量百分浓度为1%。
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