[发明专利]一种阿魏菇多糖提取与纯化的方法

权利要求书

1.一种阿魏菇多糖的提取纯化方法，其特征在于，具体的制备方法如下：

（1）将干燥阿魏菇子实体，用粉碎机粉碎并过筛，称取过40目的阿魏菇粉末与80%乙醇按照料液比1：10至1:15（g/ml）80℃回流4h，滤除乙醇，残渣减压蒸发至干；

（2）超声—微波提取：将步骤（2）得到的残渣与水按照料液比1：15（g/ml）混合后移入超声微波萃取仪中，在超声功率50W，提取温度70℃，微波频率2450MHz，功率70W，提取15min，然后滤液离心过滤后将残渣再次进行超声微波提取，合并两次滤液，再次离心后，取上清液，上清液去除杂质；

（3）醇沉：向步骤（2）得到的上清液中加入95vt%工业乙醇（体积百分浓度）静置12-24小时后，4000r/min冷冻离心15min得到沉淀物；

（4）冷冻干燥：步骤（3）收集的沉淀物，3倍去离子水溶解后，放入真空冷冻干燥仪，在真空度-0.06 MP至-0.08MP、温度≤-40℃，在12-24小时处理完毕；

（5）聚酰胺层析柱纯化：将步骤（4）中沉淀物3倍体积去离子水溶解，溶解形成的多糖粗提液,然后装入聚酰胺层析柱中利用响应面优化方法测定纯化前后的多糖含量，多糖纯度，蛋白脱含量为评价指标，确定吸附洗脱最佳条件：聚酰胺用量，去离子水用量，洗脱速度，得到当聚酰胺用量粗多糖5倍体积，洗脱液为2倍柱体积去离子水，洗脱速度1.5ml/min时多糖得率为27.29% ，多糖纯度72.49% ，蛋白脱除率62.35% ；

（6）浓缩干燥：将步骤（5）得到多糖洗脱液收集合并，并减压蒸发浓缩，4000r/min冷冻离心15min得到浓缩液后，冷冻干燥得到纯化后阿魏菇多糖。