[发明专利]一种从沙棘叶中提取降糖成分的方法

说明书

技术领域

本发明一种从沙棘叶中提取降糖成分的方法，属于植物降糖成分提取技术领域。

背景技术

科罗索酸又名2α-羟基熊果酸，是一种五环三萜类酸，来源于大花紫薇的提取物。Garcia（1940）用大花紫薇干叶喂养普通家兔，发现家兔的血糖下降，并与1956年又采用大花紫薇叶提取物进行临床实验，发现其具有降低糖尿病病人血糖的效果。Murakami（1993）等从大花紫薇的叶中分离出2种三萜酸（科罗索酸和山楂酸），发现科罗索酸具有降血糖的效果。Hamamoto（1999）等发现小鼠和兔子服用科罗索酸后有明显的降血糖作用，与使用胰岛素的效果相同。Toshihiro Miura（2004）认为科罗索酸可以通过肌肉中的葡萄糖转运体（GLUT4）促使葡萄糖转运至细胞内，从而降低血糖，起到了胰岛素类似物的作用，所以被称为“植物界的胰岛素”。任新凤（2011）指出科罗索酸能使HepG2细胞对葡萄糖利用率明显上升，验证了前人的观点。科罗索酸主要存在于大叶紫薇和枇杷叶中，其他植物中也有过报道，但含量都不高。科罗索酸在植物体内可游离存在，也可以皂甙的形式存在，并常常与其同分异构体山楂酸（2α-羟基齐墩果酸）共同存在，结构和化学性质相似，分离较难。2014年首次对沙棘中的五环三萜类酸物质进行了测定，由于该类物质成分复杂，有些类似物的成分不易分离，故含量以科罗索酸的量为标准，沙棘中为0.05%，含量较低，到目前为止尚未见对其进行浓缩的报道。

沙棘为果、叶两用植物，目前沙棘叶已被当成茶叶进行饮用，有较高的营养价值。现有技术对植物科罗索酸的提取和浓缩有多种方法，但用于沙棘植物效果均不理想。按照现有方法对沙棘叶进行提纯浓缩，得到的浓缩产物中，科罗索酸的含量达不到0.3%。这种程度的浸提物降糖效果很不理想。

发明内容

本发明克服现有技术的不足，所要解决的技术问题是提供一种从沙棘叶中提取浓缩降糖成分的方法。

为解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案按照如下方法：

1、经杀青和干燥（温度不宜过高，以不高于60℃为宜，尽量保存活性物质的有效性）后的沙棘叶粉碎成20目-60目的粗粉，放入10-20倍的自来水煮沸即可，冷却到室温，备用。

2、保温浸泡

可以选用三种方法中的任一种，其他条件相同的情况下，三种方法得到的浸膏科罗索酸的含量依次提高；

方法一：加入1%-5%的酿酒大曲（也可以加入啤酒酵母粉），26℃-36℃，保温3-5天，使多糖类物质，蛋白质和脂类等生物大分子物质分解，增加水浸出物的含量。如果温度低于26℃（室温必须要高于18℃），可增加保温时间2-3天；如果室温高于36℃，3天即可；

方法二：加入混合酶制剂（纤维素酶：淀粉酶：果胶酶＝1：1：1）0.5%，28℃-38℃保温12-24h，使植物组织通透性增大，增加科罗索酸从细胞中的溶出率；

方法三：加入0.5%-1%的食用醋室温放置24h。

3、干燥：将浸泡后的沙棘叶过滤，弃滤液，干燥（温度最高60℃），得沙棘叶粉备用。

4、提取

方法一：用重量比大于沙棘叶粉5倍以上（加入乙醇的量越大提取率越高）85%-100%的乙醇，在80℃-90℃提取，回流2次，过滤，减压回收乙醇得浸膏；

方法二：用1%的NaOH将甲醇配制成80%-90%的甲醇提取液（NaOH浓度越高科罗索酸的溶解度就越高），用重量比大于沙棘叶粉5倍以上的甲醇提取液室温提取，回流2次，过滤，减压回收甲醇得浸膏。

与现有技术相比本发明具有以下有益效果：按照本申请的方法对沙棘叶中科罗索酸进行浓缩，能够使其含量达到1%以上，通过大鼠试验有较强的降糖效果，且降糖效果优于科罗索酸纯品，不仅为沙棘叶的开发起到较大的推动作用，也为糖尿病的治疗找到了一种新的治疗药物。

具体实施方式

以下结合具体实施例对本发明作进一步说明。

实施例1

一种从沙棘叶中提取降糖成分的方法，按照以下步骤：

一、前处理

将沙棘叶经杀青、干燥后，粉碎成粗粉，加入粗粉质量15倍的水煮沸，冷却至室温，得到沙棘叶预煮液；

二、保温浸泡

按预煮液的质量加入3wt%大曲，混匀，在26-30℃条件下保温3天；

三、干燥

将保温浸泡后的预煮液过滤，滤渣干燥得到沙棘叶粉，备用；

四、提取