[发明专利]依折麦布关键中间体的对映异构体的分离检测方法

说明书

本发明公开了一种柱前衍生化高效液相色谱法来分离检测依折麦布关键中间体A及其对映异构体的方法。该方法采用在有机醇溶液中，使用一定浓度的酸性溶液对依折麦布关键中间体A和其对映异构体进行脱去三甲基硅基保护基的反应，反应一定时间后，经简单后处理即得到脱去保护基的衍生化产物。衍生化后的依折麦布关键中间体A及其对映异构体可以采用以手性填料为固定相的高效液相色谱法进行分离检测。

技术领域

本发明涉及一种依折麦布关键中间体的对映异构体的分离检测方法，属于药物分析领域。

背景技术

依折麦布是由先灵葆雅公司(Schering-Plough Pharmaceuticals)研发上市的选择性肠道胆固醇吸收抑制剂，2002年在美国上市，商品名为Zetia。2011年7月，CFDA批准该品种在国内上市，商品名为益适纯(Ezetrol)。

依折麦布作为第一个上市的选择性肠道胆固醇吸收抑制剂，其作用机制是附着于小肠绒毛刷状缘，有效地抑制胆固醇和植物固醇的吸收，从而降低小肠中的胆固醇向肝脏中的转运，使得肝脏胆固醇贮量减少从而降低血浆胆固醇水平。它不增加胆汁分泌，也不抑制胆固醇在肝脏中的合成。与安慰剂比较，依折麦布可以抑制54％的胆固醇吸收，同时并不影响小肠对甘油三酯、脂肪酸、胆汁酸、孕酮、乙炔雌二醇及脂溶性维生素A、D的吸收。临床上，依折麦布常与他汀类药物联合使用，可以进一步改善血清中总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、载脂蛋白B、总甘油三酯及高密度脂蛋白胆固醇水平，优于两种药物的单独应用。

依折麦布化学名为1-(4-氟苯基)-3(R)-[3-(4-氟苯基)-3(S)-羟丙基]-4(S)-(4-羟苯基)-2-吖丁啶(氮杂环丁烷)酮，是一个具有多手性中心的手性化合物，其化学结构式如下所示：

依折麦布的合成路线和方法已见报道的有很多，其中一条路线的关键合成步骤是采用Evans手性辅助试剂的衍生物和亚胺缩合，得到关键中间体A，再经过关环和脱保护得到依折麦布成品(中国医药工业杂志，2006,37,364～366.)，合成路线如下所示：

由以上合成路线可以看到，依折麦布分子中β内酰胺环上的二个手性中心，是在合成关键中间体A的缩合反应步骤中一次性构建的。因此，该步缩合反应的立体选择性将决定关键中间体A的手性异构体(包括对映异构体和非对映异构体)含量的高低，乃至决定最终产品依折麦布中的对映异构体和非对映异构体含量的高低。在手性药物的研究中，立体异构体的研究是其质量研究中的重点之一，详细请见《手性药物质量控制研究技术指导原则》(国食药监注[2006]639号)。理论上，非对映异构体之间可采用非立体专属性的方法进行分离检测，而对映异构体则需要立体专属性的方法来分离检测。因此，研究开发关键中间体A对映异构体的分离检测方法，对于优化合成工艺、控制关键中间体A中对映异构体的含量尤为重要，进而为控制最终产品依折麦布中对映异构体的含量奠定基础。

目前，在国内外相关文献中未见有关依折麦布关键中间体的分析检测方法的报道。本发明提供了一种准确、稳定可靠、灵敏度高的依折麦布关键中间体A对映异构体的分离检测方法，该方法对于依折麦布的质量研究和控制具有非常重要的意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种柱前衍生化高效液相色谱法来分离依折麦布关键中间体A和其对映异构体。该方法准确、稳定可靠，灵敏度高，可很好地分离依折麦布关键中间体A和其对映异构体，可用于依折麦布原料药生产过程中的质量控制。

为了实现本发明的目的，发明人通过大量试验研究，最终获得如下采用柱前衍生化高效液相色谱法的技术方案。

柱前衍生化的方法如下：在有机醇溶液中，使用一定浓度的酸性溶液对依折麦布关键中间体A和(或)其对映异构体进行脱去三甲基硅基(TMS)保护基的反应，反应一定时间后，经简单后处理即得到脱去保护基的衍生化产物。衍生化反应如下所示：