[发明专利]利用厨房废弃油生物转化合成甘露糖赤藓糖醇脂的方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物工程和微生物发酵领域，尤其涉及一种利用厨房废弃油生物转化合成甘露糖赤藓糖醇脂的方法。

背景技术

生物表面活性剂不仅具有化学表面活性剂具有的各种表面性能，而且还拥有下列优点：(1)选择性广，对环境友好；(2)庞大而复杂的化学结构使得表面活性和乳化能力更强；(3)分子结构类型多样，具有许多特殊的官能团，专一性强；(4)原料在自然界广泛存在且价廉；(5)发酵生产是典型的“绿色”工艺等。

甘露糖赤藓糖醇脂(Mannosylerythritollipids，MELs)是一种新型的非离子型生物表面活性剂，是现在国内研究较少的一类糖脂。甘露糖赤藓糖醇脂应用于环保、食品、化妆品，用作乳化剂、表面活性剂、面粉品质改良剂、保湿剂、抗凝结剂(抑制低温储存冰浆中冰粒的凝结)。甘露糖赤藓糖醇脂在医药工业中的应用，是基于其特有的生理活性：如提高基因转染效率、抑制微生物生长、诱导细胞变异、可分化人类骨髓性白血病细胞系和黑素瘤细胞、与糖蛋白有较强的配位能力等。

目前，报道过可以产生MELs的有霉菌和酵母菌，产量不尽相同，国外研究最高产量可达165g/L，其产业化前景备受关注。

Pseudozyma aphidis DSM 70725(P.a.DSM70725)作为一种新的生产MELs的微生物被发现。Rau.U等人对培养基碳源和无机盐的添加量、发酵条件、产物回收和分离纯化等对产物的影响进行了研究。而发酵过程利用的碳源主要为大豆油等可食用植物油，此外补充添加甘露糖和赤藓糖醇作为碳源，促进甘露糖赤藓糖醇的合成，发酵10天后，最高产量达75g/L。

公开号为CN103589764A专利公开了一种甘露糖赤藓糖醇脂的生产 方法，包括：将经活化的蚜虫拟酵母(Pseudozyma aphidis)DSMZ70725接入种子培养液中进行种子培养，培养后分离得到菌体细胞；将菌体细胞接入发酵培养基中，于28～30℃条件下发酵培养7～15d，得到发酵液；从发酵液中分离纯化得到甘露糖赤藓糖醇脂；其中，所述的发酵培养基中含有植物油。该发明方法所用底物为植物油。

然而使用大豆油等可食用植物油作为碳源对于工业生产而言，造成原料成本高，影响产品在市场中的竞争力。

厨房废弃油为在餐饮业以及食品加工过程中所产生的废弃的油脂，俗称地沟油、潲水油、泔水油、老油、下脚油等，回收价格低廉。厨房废弃油作为地沟油的一类，广泛存在与人们的生活中。近些年，关于地沟油充当食用油的丑闻时不时被媒体报道出来，引发社会的舆论关注。众所周知，地沟油对人体危害极大，长期食用可引发癌症。

目前，地沟油充当食用油流通于市场中的原因众多，例如：法律监管体制不够完善、对地沟油的利用渠道较少等。

发明内容

本发明的目的在于提供一种利用厨房废弃油进行生物转化合成甘露糖赤藓糖醇酯的方法，不仅有效解决甘露糖赤藓糖醇酯生产原料成本高的问题，而且提供了一种回收利用地沟油的方法，有效提高地沟油的工业价值。

为实现上述目的，本发明提供了如下技术方案：

一种利用厨房废弃油生物转化合成甘露糖赤藓糖醇脂的方法，包括：将蚜虫拟酵母(Pseudozyma aphidis)DSMZ70725接入发酵培养基，发酵培养获得甘露糖赤藓糖醇脂，所述的发酵培养基中包括厨房废弃油。

本发明所使用菌种为蚜虫拟酵母(Pseudozyma aphidis)DSMZ70725，该菌种购于德国菌种保藏中心，Deutsche Sammulung von Microorganismen und Zellkulturen(DSMZ)。

所述厨房废弃油为大豆油、菜籽油、花生油、玉米胚芽油中的至少一种所产生。作为优选，所述厨房废弃油为大豆油所产生。

厨房废弃油采用现有技术，由回收的泔水经过滤、脱水后得到。

具体的发酵培养方法如下：

(1)将经活化的蚜虫拟酵母(Pseudozyma aphidis)DSMZ70725接入种子培养基进行种子培养，得到菌体细胞；

(2)将菌体细胞接入发酵培养基进行发酵培养，得到发酵液；

(3)从发酵液中分离纯化得到甘露糖赤藓糖醇脂。

步骤(1)中，所述的活化为：将蚜虫拟酵母DSMZ70725接种到活化培养基中，于28℃～32℃、摇床振荡培养1d～2d，摇床转速为150rpm～200rpm。