[发明专利]生物可降解聚乳酸‑羟基乙酸共聚物/壳聚糖载药微球制备方法及产品

说明书

技术领域

本发明涉及一种可降解药物载体材料，特别是一种表面改性的聚乳酸-羟基乙酸共聚物复合载药微球的制备方法。

本发明还涉及上述方法得到的复合载药微球。

背景技术

近年来，随着基因工程重组技术和蛋白组学的发展，多肽和蛋白类药物在临床上的应用日益广泛、深入。由于该类药物在体内外稳定性差，半衰期短，易受肠胃道pH环境和酶的影响而失活，需要频繁、大剂量及长时间给药，导致毒副作用及耐受性的产生，严重影响了其临床使用效果。因此，对多肽、蛋白质类生物活性药物的保护的研究具有重要意义。

聚乳酸-羟基乙酸共聚物(简称PLGA)是生物可降解的功能高分子有机化合物，不但具有无毒，可降解，生物相容性好等优点，并且已经被美国食品和药物管理局(FDA)批准用于人体，在制药领域有着巨大的应用前景。由于其降解速率随着两种化合物组成比例的不同而变化，因此可以根据药物的性质和用途选择不同比例组合成的聚乳酸-羟基乙酸，制备成具有特定功效的微球制剂。但是，PLGA作为药物载体材料也存在着不足：(1)在药物释放过程存在明显的突释效应，增加了药物的副作用，也可能造成药物浪费而使微球无法长期释放；(2)PLGA微球与机体细胞缺少特异性的结合，细胞摄取能力不强，药物吸收效果不佳。

壳聚糖(CS)是一种碱性多糖，其结构中含有羟基、氨基、正电荷密度高，有利于细胞的粘附，且价廉易得，无毒无味，在体内降解为氨基葡萄糖能被吸收；同时壳聚糖具有活化巨噬细胞、诱导免疫调节因子的表达等功能，具有优良的生物相容性和吸附性。

近年来，基于壳聚糖改性修饰的PLGA载药微囊已经被用到各种药物的包载及缓释上，改性修饰的方法主要有物理法和化学法两种，所谓化学法主要是用壳聚糖与PLGA共价交联制备共聚物，然后自组装得到载药微囊，如中国专利CN103006567A公开了一种载亲水性药物的壳聚糖-PLGA复合纳米微粒的制备方法。物理法较化学法过程简单易行，主要是基于两种带相反电荷聚合物之间的静电引力复合而成，大多采用乳化溶剂挥发技术制备的，中国专利CN104001178A公开了一种由单乳法制备的PLGA纳米微球内核和香草醛交联壳聚糖外壳构成的PLGA纳米药物载体，并将其应用于包载疏水性肿瘤药物。其主要缺陷在于该复合载体的药物包载率较低，造成原料浪费且无法达到长期缓释的目的。本发明采用改良物理法制备包载亲水性蛋白类药物的PLGA-CS复合微球，本发明首先对PLGA进行表面水解改性，从而增加其羧基含量，提高其电荷量，为了进一步提高载药率、延长缓释时间，采用层层自组装技术制备多层复合PLGA-CS载药复合微球。

发明内容

本发明是为了解决现有技术中的上述不足而完成的，本发明的目的是提供一种生物可降解聚乳酸-羟基乙酸PLGA/壳聚糖载药微球的制备方法。

技术方案如下：

所述方法包括以下步骤：

(1)PLGA的水解

将PLGA膜浸泡于30-50℃浓度为约2mol/L NaOH溶液中，2.0-6.0h后取出，用1mol/L HCl溶液清洗，以除去表面残留的NaOH，然后在超声波条件下用乙醇和去离子水洗涤2次，置于30℃真空干燥24h，得到水解的PLGA；

(2)PLGA-CS载药微球的制备

称取定量的壳聚糖溶于乙酸溶液中，配成浓度为1％的壳聚糖溶液待用；

取大约0.5g水解后的PLGA溶于20mL二氯甲烷中，再加入10mL浓度5-10wt％的BSA(牛血清蛋白)水溶液，加入0.2mL吐温80超声乳化1min，得到的油包水(W/O)乳液倒入100mL浓度为1％的PVA(聚乙烯醇)水溶液中，超声乳化2min，所得的W/O/W乳液在室温下磁力搅拌，同时滴加5g浓度为1％的壳聚糖溶液，0.5h后滴加1g三聚磷酸钠(TPP)，之后继续搅拌3h，使有机溶剂完全挥发，微球固化成型，得到带正电荷的PLGA两层复合载药微球；将其置于20mL溶有0.5gPLGA的二氯甲烷溶液中，25℃下超声振荡30min后离心分离清洗，得到带负电荷的三层复合载药微球；将其加入5g浓度为1％的壳聚糖溶液中，磁力搅拌0.5h后滴加1gTPP，0.5h后离心分离，用蒸馏水洗涤3次，冷冻干燥24h后即得PLGA复合载药微球粉末产品。

本发明还进一步要求保护上述方法制备得到的生物可降解聚乳酸-羟基乙酸PLGA/壳聚糖载药微球。

附图说明

图1是本发明载药微球的体外释放曲线。

具体实施方式