[发明专利]一种从亚麻籽油中获得抗肿瘤活性成分物质的提取纯化方法

说明书

本发明涉及一种从亚麻籽油中获得抗肿瘤活性成分物质的提取纯化方法，步骤如下：(1)将乙醇溶液与亚麻籽油置于混合仪中混合，调节pH，搅拌，静置待分层界面形成后，旋转浓缩，形成浸膏；(2)将步骤(1)的浸膏放置于提取罐中，加入亚临界水，将得到的提取液旋转浓缩，真空冷冻干燥得到粗提物；(3)称取步骤(2)得到的粗提物，利用高速逆流色谱纯化溶剂系统，得到纯化提取物。本发明在提取纯化过程中，采用了可用于食品生产的溶剂，符合国家相关的法规规定，避免大量的有机溶剂使用造成的残留风险。将上述方法得到的提取物通过肿瘤细胞增殖实验验证，均具有抑制肿瘤细胞生长的细胞学功效，可用于辅助抑制肿瘤保健食品方面的应用。

技术领域

本发明涉及植物有效成分提取纯化工艺，尤其涉及一种从亚麻籽油中获得抗肿瘤活性成分物质的提取纯化方法，属于植物加工提取领域。

背景技术

亚麻籽(Linum ustitatissimum L)又称胡麻，属亚麻科、亚麻属，是世界十大油料作物之一，主要出于加拿大、阿根廷、印度、美国、中国等国家。亚麻籽中主要含有脂肪、蛋白、糖类等功能性成分，更为重要的是亚麻籽富含α—亚麻酸含量的亚麻籽油，亚麻籽油是目前n—3脂肪酸含量最高的已知植物油脂之一。近年来研究发现，亚麻籽油具有预防高脂血症、动脉粥样硬化、降低血压、增强胰岛素降低血糖的作用。

癌症是威胁人类健康的一大凶手，是仅次于心脑血管疾病的第二大致死性疾病(如果将心血管疾病和脑血管疾病分开统计，癌症则位于第一位)，严重地威胁人类健康和生命。现在临床上应用的抗癌药物虽然种类不少，但价格昂贵，毒副作用严重，且尚没有治疗某些癌症的特效药。植物在漫长的进化过程中合成了许许多多结构各异的次生代谢产物，这些次生代谢产物不仅具有不同的生物活性，还常常被发现有新的作用机制，从植物在内的自然界中寻找发现高效低毒的抗癌活性成分或先导化合物一直是国内外药物学家十分关注的课题和研究的热点。

目前，专利号CN101945888A公开了一种从油回收疏水性肽的方法，采用从植物材料中提取油类物质，并将提取的油分离成非极性和极性馏分，从不同馏分中分离回收疏水性肽类物质。该方法在实施过程中大量采用了多种有机溶剂如烃、酮、酯、醚、芳香物质等，这些有机溶剂的使用，造成了产品中溶剂残留，通过此方法得到的成分无法应用于国内日常的保健食品中，且实验过程条件要求比较苛刻，对工作人员身体造成了一定的伤害，该方法的工艺比较繁琐，未来实现大规模生产的可能性较低。

发明内容

本发明针对上述现有技术存在的不足，提供一种从亚麻籽油中获得抗肿瘤活性成分物质的提取纯化方法。

本发明解决上述技术问题的技术方案如下：一种从亚麻籽油中获得抗肿瘤活性成分物质的提取纯化方法，包括以下步骤：

(1)萃取：将乙醇溶液与亚麻籽油置于混合仪中混合，调节pH，搅拌，静置待分层界面形成后，旋转浓缩，形成浸膏；

(2)亚临界水提取：将步骤(1)的浸膏放置于提取罐中，加入亚临界水，将得到的提取液旋转浓缩，真空冷冻干燥得到粗提物；

(3)高速逆流色谱纯化：称取步骤(2)得到的粗提物，利用高速逆流色谱纯化溶剂系统，将正己烷、乙酸乙酯、甲醇和水加入分液漏斗中，震荡使溶液充分混合，放置1h，分相平衡后分出上相和下相；以溶剂系统的下相为固定相，上相为流动相，调整转速，泵入流动相，减压回收试剂，得到纯化提取物。

在上述技术方案的基础上，本发明还可以做如下改进。

进一步，步骤(1)中所述的乙醇溶液和亚麻籽油的体积比为(1～5):1，所述乙醇溶液的体积浓度为90～100％。

进一步，步骤(1)中调节pH为4.5～6，搅拌0.5～1h。

进一步，步骤(2)中所述浸膏和亚临界水的重量比为1:(10～50)

进一步，步骤(2)中所述冷冻温度为-20～-40℃。