[发明专利]一种海星优质卵子的促熟和人工受精方法

权利要求书

1.一种海星优质卵子的促熟和人工受精方法，其特征在于它包括以下步骤：

（1）海星亲本的培育

    将海星亲本置于15～16℃恒温的水族箱内培养，培养期间投喂小型浮游动物，2～3天投喂一次，4～6天换水100%；

（2）海星性腺组织的采集

    分别采集海星臂雌性性腺中的卵液和雄性性腺中的精液；

（3）海星卵子的人工促熟

向采集到的所述卵液中加入终浓度为2μM的1-甲基鸟嘌呤，置于16℃培养箱中，用摇床摇动1～2h后卵子成熟；采用新鲜海水洗涤卵子备用；

（4）人工受精

将采集到的所述精液用海水稀释50～100倍得精子稀释液，吸取所述精子稀释液加入到2×10³～5×10³个卵子中，再加入30～50mL海水，轻轻摇动5～10分钟，在解剖镜下观察受精效果，卵膜举起，表明受精完成。

2.根据权利要求1所述的海星卵子的促熟和人工受精方法，其特征在于：所述步骤（1）中初始水温为12℃，采用电热棒加温，每天升温0.5～1℃，至16℃时维持此温度。

3.根据权利要求1所述的海星卵子的促熟和人工受精方法，其特征在于：所述步骤（1）中小型浮游动物为卤虫和/或小型桡足类。

4.根据权利要求1或3所述的海星卵子的促熟和人工受精方法，其特征在于：所述小型浮游动物的饲喂量为每只海星0.5～1g。

5.根据权利要求1所述的海星卵子的促熟和人工受精方法，其特征在于：所述步骤（2）中采用直径2～3mm的锥形钢针在海星一臂上轻轻打开一个直径为2～3mm的小孔，用弯头镊子将发育良好的少量性腺取出，将取出的雌性性腺放于少许海水中，置于冰上，通过纱网过滤后获得海星卵子；将取出的雄性性腺组织剪碎离心，取上清液体为精液，置于冰上。

6.根据权利要求5所述的海星卵子的促熟和人工受精方法，其特征在于：所述性腺呈橘红色为雌性且表明性腺发育良好；性腺呈乳白色为雄性且表明性腺发育良好。

7.根据权利要求1所述的海星卵子的促熟和人工受精方法，其特征在于：所述步骤（3）中卵液中卵子的浓度为1×10³~2×10³个/mL。

8.根据权利要求1所述的海星卵子的促熟和人工受精方法，其特征在于：所述步骤（4）中精子稀释液的浓度为1×10⁵~2×10⁶个/mL。