[发明专利]一种麻疹病毒一步实时荧光定量RT-PCR试剂盒在审
申请号: | 201510183393.9 | 申请日: | 2015-04-18 |
公开(公告)号: | CN104846119A | 公开(公告)日: | 2015-08-19 |
发明(设计)人: | 刘为勇;王涛 | 申请(专利权)人: | 湖北创瑞生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68 |
代理公司: | 荆门市首创专利事务所 42107 | 代理人: | 裴作平 |
地址: | 448124 湖北省荆门*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 麻疹病毒 一步 实时 荧光 定量 rt pcr 试剂盒 | ||
1. 一种麻疹病毒一步实时荧光定量RT-PCR试剂盒,其特征在于:
本试剂盒包括麻疹病毒的一对特异性引物、一条特异性荧光探针、阳性对照、阴性对照、一步5×RT-PCR Buffer和Enzyme Mix;
①麻疹病毒的一对特异性引物
依据麻疹病毒N基因序列设计特异性引物:
F:5'-ACASRGTGATCAAARTGRRARYGAGCTC-3',
R:5'-GYCCTGCCATGGYYTGCAC-3';
②麻疹病毒的一条特异性荧光探针
依据麻疹病毒N基因序列设计特异性探针:
FP:FAM-ATCYGATRCAGTRTCAATT-MGB-NQF;
③阳性对照
麻疹病毒标准品;
④阴性对照
RNase Free H2O;
⑤一步5×RT-PCR Buffer配制:
Tris·Cl 20mM
KCl 80mM
(NH4)2SO4 80mM
DTT 1.5mM
MgCl2 12mM
dNTP 10mM ,
配置混合后于冰箱-20℃保存;
⑥Enzyme Mix配制:
Tris·Cl 20mM
KCl 80mM
DTT 1mM
EDTA 0.1mM
Nonidet P-40 0.5%
Tween 20 0.5%
甘油 50%
Taq酶 2.5U/ul
M-MLV酶 2.5U/ul,
配置混合后于冰箱-20℃保存。
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