[发明专利]采用耐旱强化活性纳米垃圾堆肥调剂干旱胁迫草坪草保护酶的方法

权利要求书

1.一种采用耐旱强化活性纳米垃圾堆肥调剂干旱胁迫草坪草保护酶的方法，其特征在于按如下的步骤进行：

（1）草皮基质组配与强化微生物联合纳米堆肥应用

中度干旱胁迫：60%~40%，重度干旱胁迫：40%~20%，土壤和30-35nm纳米堆肥按59：1的比例混合并加入15ml强化耐旱微生物菌剂；所述的微生物指的是：蜡样芽孢杆菌、粘红酵母和赖氨酸芽孢杆菌按体积比1:1:1的配制成；强化耐旱微生物菌剂指的是：在强化过程中，视OD₆₀₀增长而逐步提高PEG6000浓度，PEG6000的浓度以5%的梯度增加，最终目标是25%；

（2）以灭菌后的土壤为基质进行草坪植物栽培试验，纳米堆肥采用混施的方式施入土壤基质，实验时基质用量为9400gm^-2，草皮基质厚度为15 mm，高羊茅草种播种量为160gm^-2，将种子浸泡24h后均匀播洒于基质表层，首先进行黑暗处理，萌发后植株生长初期，每天统一定量给水，以保持培养基质水分状况良好，生长第10d时分别浇入15ml灭菌后的空白培养基和强化耐旱微生物菌剂，生长15d后进行干旱胁迫，按照胁迫程度进行称重浇水，以维持在胁迫范围内，干旱胁迫持续25d后取样，进行生理生态指标测定，实验期间光照强度为400-600μmol.m^-2.s^-1，室内的相对湿度为50-55%，温度为20-23℃，最后将草坪植物齐基质刈割，测量地上鲜重，根部用蒸馏水冲洗干净，置于烘箱中105℃条件下杀青30 min，80℃ 烘干至恒重，进行测定。

2.权利要求1所述采用耐旱强化活性纳米垃圾堆肥调剂干旱胁迫草坪草保护酶的方法，其中：（1）纳米堆肥的制备：将生活垃圾堆肥105℃烘干至恒重，将垃圾堆肥加工研磨制成30-35nm纳米堆肥，备用；

（2）草皮基质组配与强化微生物联合纳米堆肥应用

中度干旱胁迫：60%~40%，重度干旱胁迫：40%~20%，每个胁迫设3个处理，4次重复，两个胁迫所设处理相同，分别为:

1）以100%土壤为对照基质并加入15 ml空白培养基

2）土壤和纳米堆肥按59：1的比例混合并加入15ml空白培养基       

3）土壤和纳米堆肥按59：1的比例混合并加入15ml强化耐旱微生物菌剂；（3）以灭菌后的土壤为基质进行草坪植物栽培试验，纳米堆肥采用混施的方式施入土壤基质，实验时基质用量为9400gm^-2，草皮基质厚度为15 mm，高羊茅草种播种量为160gm^-2，将种子浸泡24h后均匀播洒于基质表层，首先进行黑暗处理，萌发后植株生长初期，每天统一定量给水，以保持培养基质水分状况良好，生长第10d时分别浇入15ml灭菌后的空白培养基和强化耐旱微生物菌剂，生长15d后进行干旱胁迫，按照胁迫程度进行称重浇水，以维持在胁迫范围内，干旱胁迫持续25d后取样，进行生理生态指标测定，实验期间光照强度为400-600μmol.m^-2.s^-1，室内的相对湿度为50-55%，温度为20-23℃，最后将草坪植物齐基质刈割，测量地上鲜重，根部用蒸馏水冲洗干净，置于烘箱中105℃条件下杀青30 min，80℃ 烘干至恒重，进行测定。

3.权利要求1所述采用耐旱强化活性纳米垃圾堆肥调剂干旱胁迫草坪草保护酶的方法，其中： PEG6000的浓度分别为5%、10%、15%、20%和25%，每增加一次PEG6000的浓度，要待菌体增长量稳定后，才能继续增加PEG6000的浓度，逐级强化出耐旱混合微生物菌群。

4.权利要求1所述采用耐旱强化活性纳米垃圾堆肥调剂干旱胁迫草坪草保护酶的方法在提高高羊茅的生长增强植株对干旱胁迫适应能力方面的应用。