[发明专利]一种从素馨花中提取高纯度橄榄苦苷的方法

权利要求书

1.一种从素馨花中提取高纯度橄榄苦苷的方法，其特征在于该方法的步骤如下：

A、乙醇水溶液浸提

按照素馨花花蕾与以重量计55～65％乙醇水溶液的重量比1:10～14，取干燥的素馨花花蕾原料在乙醇水溶液中在室温的条件下浸泡2～4次，每次46～50h，每次得到的提取液进行过滤，滤液合并，然后在温度46～50℃的条件下进行浓缩，干燥得到素馨花提取浸膏M1；

B、大孔树脂柱吸附

步骤A得到的素馨花提取浸膏M1用甲醇水溶液溶解，让得到的溶液通过预处理大孔树脂柱进行吸附，接着用蒸馏水冲洗，再用以重量计65～75％乙醇水溶液洗脱，得到的乙醇洗脱液E1在温度42～48℃的条件下干燥浓缩，得到淡黄色粉末M2；大孔树脂柱吸附与洗脱条件如下：上样液质量浓度为生药0.06～0.10g·mL-1，柱径高比1:2～4，上样量的重量比为M1/大孔树脂＝3:8～12，吸附流速1.5～2.5BV·h-1；洗涤蒸馏水用量6～10BV；洗脱溶剂为以重量计65～75％乙醇水溶液，其用量为3.5～4.5BV，洗脱流速为1.5～2.5BV·h-1；

所述的大孔树脂选自XDA-16、HPD-100、XDA-1或HPD-400、D-101型的大孔树脂；所述的大孔树脂预处理步骤如下：所述的大孔树脂使用以重量计90～95％乙醇水溶液浸泡22～26h，湿法装柱，再用以重量计90～95％乙醇水溶液洗脱，直至流出液与水混合不呈白色浑浊，然后用水洗脱至没有乙醇气味；

C、聚酰胺柱吸附

经过预处理的聚酰胺装柱，步骤B得到的淡黄色粉末M2用甲醇水溶液溶解，让得到的溶液通过预处理聚酰胺柱进行吸附，接着用蒸馏水冲洗，再用以重量计75～85％乙醇水溶液洗脱，得到的乙醇洗脱液E2在温度42～48℃条件下干燥浓缩，得到乳白色粉末M3；

D、制备橄榄苦苷

步骤C得到的乳白色粉末M3通过硅胶柱层析分离，用干法方式上样，接着用氯仿甲醇混合溶剂洗脱，得到的洗脱液减压除去溶剂，得到橄榄苦苷粗品在甲醇中在温度0～4℃的条件下结晶，过滤，干燥，得到所述的橄榄苦苷。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于在步骤C中，所述的聚酰胺的粒度为30～90目；所述聚酰胺预处理步骤如下：30～90目聚酰胺在以重量计90～95％乙醇水溶液中浸泡22～26h，然后装入层析柱中，加入1.8～2.2mol/L氢氧化钠水溶液浸泡3.5～4.5h，接着用蒸馏水洗涤至中性；然后加入3.5～4.5mol/L盐酸水溶液浸泡7～9h，接着用蒸馏水洗涤至中性；最后加入以重量计90～95％乙醇水溶液浸泡9～11h，再用蒸馏水洗涤至无醇味。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于在步骤C中，聚酰胺柱的吸附条件如下：上样量的重量比为M2/聚酰胺＝16.0-16.5mg·g-1，上样液质量浓度为3.40～3.60mg·mL-1，上样液pH为5.8～6.2，柱径高比1:2～4，吸附流速为1.8～2.2BV·h-1；洗涤蒸馏水用量1.8～2.2BV，洗脱溶剂为以重量计75～85％乙醇水溶液，其用量为3.5～4.5BV，洗脱流速1.8～2.2BV·h-1。