[发明专利]一种用于靶向捕获癌细胞的叶酸功能化纳米纤维的制备方法

权利要求书

1.一种用于靶向捕获癌细胞的叶酸功能化纳米纤维的制备方法，包括：

(1)以水为溶剂，聚乙烯醇PVA与聚乙烯亚胺PEI按照质量比为3:1配制纺丝液，通过静电纺丝制备得到PVA/PEI纳米纤维膜，并真空干燥；

(2)将步骤(1)中制备得到的PVA/PEI纳米纤维膜与戊二醛溶液在干燥器中进行交联反应，得到不溶于水的交联PVA/PEI纳米纤维膜；

(3)以二甲基亚砜DMSO为反应溶剂，通过1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐EDC·HCl和N-羟基琥珀酰亚胺NHS活化叶酸FA的羧基，将活化后的FA加入到带有一端羧基和一端氨基的聚乙二醇NH₂-PEG-COOH溶液中，进行酰胺化反应，然后透析，冷冻干燥，得到FA-PEG-COOH；

(4)用EDC·HCl和NHS活化步骤(3)中FA-PEG-COOH的羧基，将活化后的FA-PEG-COOH加入到步骤(2)得到的纳米纤维膜中，摇床反应3-5天，得到叶酸功能化修饰的纳米纤维，加入三乙胺和乙酸酐进行乙酰化，洗涤，干燥，即得叶酸功能化纳米纤维；其中，投料摩尔比为FA-PEG-COOH:EDC·HCl:NHS＝1:5:5。

2.根据权利要求1所述的一种用于靶向捕获癌细胞的叶酸功能化纳米纤维的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中PVA的重均分子量M_W为88000，PEI的重均分子量M_W为25000。

3.根据权利要求1所述的一种用于靶向捕获癌细胞的叶酸功能化纳米纤维的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中纺丝液中PVA的浓度为12wt％。

4.根据权利要求1所述的一种用于靶向捕获癌细胞的叶酸功能化纳米纤维的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中静电纺丝技术的参数为：电压为18.6kv，流速设置为0.3ml/h，纺丝距离设置为25cm，环境湿度为40-50％。

5.根据权利要求1所述的一种用于靶向捕获癌细胞的叶酸功能化纳米纤维的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中NH₂-PEG-COOH的M_W为2000。

6.根据权利要求1所述的一种用于靶向捕获癌细胞的叶酸功能化纳米纤维的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中投料摩尔比为FA:EDC·HCl:NHS:NH₂-PEG-COOH＝2.5:2:2:1。

7.根据权利要求1所述的一种用于靶向捕获癌细胞的叶酸功能化纳米纤维的制备方法，其特征在于，所述步骤(4)中乙酰化的条件为三乙胺和乙酸酐的摩尔量均为5倍于PEI的表面氨基的摩尔量，反应时间1天。

8.根据权利要求1所述的一种用于靶向捕获癌细胞的叶酸功能化纳米纤维的制备方法，其特征在于，所述步骤(4)中叶酸功能化纳米纤维应用于表面高叶酸受体表达的癌细胞的特异性捕获。