[发明专利]栀子蓝色素的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于生物制品的提取制备技术领域，具体涉及栀子蓝色素的制备方法。

背景技术

栀子蓝色素最初是由栀子果实中京尼平苷水解后与氨基酸反应制得。栀子蓝色素溶解于水和低醇等亲水溶剂，具有耐光热、耐酸碱等优良的理化性质及独特的染色效果。栀子蓝色素不仅自身能代替合成色素使用，也可与其它品系的红、黄色素调和使用，可调配成绿、紫、棕色等一系列蓝绿变化的色调。栀子蓝色素自面世以来，由于来源自然，安全、无毒，人体相容性好，理化性能优良，染色效果显著，使其在食品、医药等诸多领域得到了广泛的应用，国内外市场需求日益增加，然而，传统的制备方法都是从栀子果中提取，而栀子果含有大量的干扰物质，导致提取工艺复杂，物耗过大、收得率低,同时原料成本也很高，产品极其昂贵，从而限制了该类成分的大量应用和我国近年相关产业的发展。

发明内容

为了开发栀子蓝色素新资源，降低生产成本，本发明提供一种利用栀子叶制备栀子蓝色素的方法。

制备栀子蓝色素的工艺操作步骤如下：

（1）分别制备栀子叶固体培养基和栀子叶液体培养基；

（2）用黑曲霉制备活化原种、一级种子、二级种子，最后制得三级种子；

（3）将三级种子接种至栀子叶固体培养基或栀子叶液体培养基，发酵培养，得到固体发酵物或发酵液；

（4）将固体发酵物或发酵液酶解，得到栀子苷酶解液；

（5）在栀子苷酶解液中加入氨基酸，加热使栀子苷苷元与氨基酸缩合生成栀子蓝色素，用树脂柱进行色素纯化，最后得到蓝黑色粉末，即为栀子蓝色素，所述栀子蓝色素在590nm，1cm比色皿，1%浓度时的色价大于190。

一种栀子蓝色素的具体制备操作步骤如下：（栀子叶固体培养基）

（1）栀子叶固体培养基的制备

将新鲜的栀子叶洗涤，控干，粉碎，100~120℃灭菌20~120分钟，冷却既得固体培养基；或将含水率1~20%的栀子叶，粉碎，按料液比1Kg:0.2~0.6L加水，混合搅拌5~30分钟，温度100~120℃灭菌20~100分钟，冷却既得固体培养基；

（2）曲霉液体种子制备

将黑曲霉（Aspergillus niger）接种于萨氏（SDAY）斜面培养基，温度25～35℃、培养4～7天，得到活化原种；

将活化原种接种到液体种子培养基，接种量为每200～1000mL培养基中接斜面菌种1支；温度25～35℃、转速150～250 rpm条件下，震荡培养3～7天，得到一级种子；

将一级菌种按体积比3～15%的接种量，扩大培养，温度25～35℃、通气量按体积比1:1～1.5、压力0.1～0.15MP条件下，培养3～7天得到二级种子；

将二级菌种按体积比3～15%的接种量，扩大培养，温度25～35℃、通气量按体积比1:1～1.5、压力0.1～0.15MP条件下，培养3～7天得到三级种子；

其中一级菌种、二级菌种和三级菌种的培养基均为液体种子培养基；

（3）接种发酵

将所述三级种子接种至栀子叶固体培养基中，接种量为每100Kg接种5~20L，温度25～35℃发酵培养2～7天，得到固体发酵物；

（4）栀子苷酶解

按料液比1Kg:0.5~5 L将固体发酵物加水打浆，温度50～70℃、酶解4～16小时，得到栀子苷酶解液；

（5）栀子蓝色素生成及纯化

在栀子苷酶解液中按每100L加入0.3~1.2Kg氨基酸，70～90℃保温3～10小时，粗滤或离心分离，对滤液或上清再进行微滤，接着将滤液泵入树脂柱中，吸附饱和，用20～100%乙醇洗脱或0.1～1mol/L的盐酸洗脱，收集蓝色洗脱液，脱去溶剂后得到蓝黑色粉末，即为栀子蓝色素，所述栀子蓝色素在590nm，1cm比色皿，1%浓度时的色价大于190。

一种栀子蓝色素的具体制备操作步骤如下：（栀子叶液体培养基）

（1）栀子叶液体培养基的制备

将新鲜的栀子叶按料液比1 Kg:0.5~3 L加水混合打浆，在100~120℃，灭菌20~100分钟，冷却既得液体培养基；或将含水率1~20%的栀子叶粉碎，按料液比1 Kg:1~6 L加水混合搅拌5~30分钟，温度100~120℃灭菌20~100分钟，冷却既得液体培养基；

（2）曲霉液体种子制备

将黑曲霉（Aspergillus niger）接种于萨氏（SDAY）斜面培养基，温度25～35℃、培养4～7天，得到活化原种；